試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody
Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF) ELISA試劑盒操作方法 英文名稱:Mouse
neurofilament protein, NF Elisa Kit 靈敏性高,高效性,原裝進(jìn)口抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無(wú)效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。 48T/96T。
產(chǎn)品名稱
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小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)
ELISA試劑盒操作方法
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英文名稱
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Mouse
neurofilament protein, NF Elisa Kit
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貨號(hào)
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XG-M64031
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公司產(chǎn)品僅用于科研優(yōu)勢(shì)特點(diǎn):
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標(biāo)本類型;
5.節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
樣本處理及要求:
1血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,請(qǐng)廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過(guò)50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,zui好使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無(wú)微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí),請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室**防護(hù)條列執(zhí)行。
USP5 Others Human 人 USP5 / ISOT 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 乙丙昔羅鈉Efaproxiral 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人肝癌細(xì)胞;Hep G2 [HepG2]氨來(lái)呫諾;氨來(lái)諾Amlexanox質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
B16細(xì)胞,色素瘤細(xì)胞 人胃癌細(xì)胞,BGC-803細(xì)胞 羅猴胎腎細(xì)胞;MA104蘿酸;D-地衣酸(標(biāo)準(zhǔn)品)(+)-Usnic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]蘿酸;D-地衣酸(+)-Usnic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL2RA Others Human 人 IL2Ra / CD25 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 茴香霉素Anisomycin, from
Streptomyces griseolus質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5檸檬酸鈣;檸檬酸鈣四水質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCalcium
, tetrahydrate
CCL20 Others Mouse 小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硫酸銫(分子生物學(xué)級(jí))質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,分子生物學(xué)級(jí)Cesium sulfate
CM-M096小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鉭試劑質(zhì)量規(guī)格:AR
N-Benzoyl-N-phenylhydroxylamine
A-375 [A375], 人惡性素瘤細(xì)胞株 瘤細(xì)胞,U-937細(xì)胞 NCI-N87(人胃癌細(xì)胞)左西孟旦質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRLevosimendan
小鼠原B細(xì)胞株;BaF3鋅試劑質(zhì)量規(guī)格:ARZincon
軟骨細(xì)胞Many types of
cells包裝:5 × 105方(1ml)D-果糖-1,6-二嶙酸三鈉100克
LL-PK1細(xì)胞,豬腎細(xì)胞 人卵巢癌細(xì)胞,A2780細(xì)胞 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-裂解物HEK-a L6201擔(dān)體 6201 Pink
dictomitq
非洲綠猴腎細(xì)胞;VEROBENZAMIDINExy7noCHLORIDE芐脒,HCl蛋白組學(xué)級(jí)50G1670-14-0COLD
IGFBP4 Others Mouse 小鼠 IGFBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) MALTOSEMONOHYDR
CXCL16 Protein Rat 重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標(biāo)簽)代森鋅Zineb質(zhì)量規(guī)格:>90%
PC-3(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FGFR3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雷公藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Wilforine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF) ELISA試劑盒操作方法人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480 [SW 480;SW-480]新藤黃酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Neogambogic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
19. 干細(xì)胞系統(tǒng)延齡草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Diosgenin glucoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CM-R040大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-反式-對(duì)香豆酰酪胺(標(biāo)準(zhǔn)品)N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
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