試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody
Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
小鼠白介素7(IL-7) ELISA試劑盒操作方法 英文名稱:Mouse
Interleukin-7, IL-7 Elisa Kit 靈敏性高,高效性,原裝進(jìn)口抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費(fèi)代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。 48T/96T。
產(chǎn)品名稱
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小鼠白介素7(IL-7)
ELISA試劑盒操作方法
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英文名稱
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Mouse
Interleukin-7, IL-7 Elisa Kit
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貨號(hào)
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XG-M64057
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公司產(chǎn)品僅用于科研優(yōu)勢(shì)特點(diǎn):
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相載體;
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)液、尿液、唾液等等多種標(biāo)本類型;
5.節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
樣本處理及要求:
1血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,請(qǐng)廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,zui好使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時(shí)建議作雙孔檢測。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時(shí),請(qǐng)按國家生物試驗(yàn)室**防護(hù)條列執(zhí)行。
PANC-1, 人胰腺癌細(xì)胞 肝癌細(xì)胞,Hep G2細(xì)胞 U-937(組織細(xì)胞瘤細(xì)胞)乙酰紫堇靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Acetylcorynoline質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3異阿魏酸(標(biāo)準(zhǔn)品)3-Hydroxy-4-methoxycinnamic
acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
LAMP1 Others Human 人 LAMP1 / CD107a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 異補(bǔ)骨脂查爾酮;補(bǔ)骨脂乙素Isobavachalcone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying
pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6異補(bǔ)骨脂二氫黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Isobavachin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 (HHSEC) ( 5×105 )異補(bǔ)骨脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)Angelicin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
THPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin /
THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)CHAPSO;3-[(3-膽氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí);CHAPSO
人張氏肝細(xì)胞;Chang liver 人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL二硫赤蘚醇(DTE);1,4-二硫代赤蘚醇質(zhì)量規(guī)格:>99%,進(jìn)分sigma1,4-Dithioerythritol
Saos-2,人成骨肉瘤細(xì)胞精噁唑禾草靈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Fenoxaprop-P
ART4 Others Cynomolgus 食蟹猴 ART4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 6-羥基煙酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC)6-Hydroxynicotinic
Acid
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5正庚醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC))質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC)1-Heptanol
LRIG1 Others Mouse 小鼠 LRIG1 / LIG-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-鼠李糖;鼠李糖一水質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BRL(+)-Rhamnose
monohydrate
MOLT-4 人急性母細(xì)胞白血病細(xì)胞鼠尾草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品Carnosol
NCI-H1975人肺腺癌細(xì)胞 Human lung adenocarcinoma
cell line NCI-H1975 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS鼠尾草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC
CM-H076人心房肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL4-甲基傘形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí)MU-alpha-GAL
OSM Others Mouse 小鼠 Oncostatin M / OSM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 粘酸(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCMucic acid
小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,基體:HCI)質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,基體:HCITellurium
standard
小鼠白介素7(IL-7) ELISA試劑盒操作方法NCI-H929-UBC-EGFP(穩(wěn)定株)人骨髓瘤細(xì)胞 NCI-H929-UBC-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(熱滅活)銩標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體:10%HCL)質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mL,基體:10%HCLThulium
standard
IL25 Protein Human 重組人 IL25 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水)質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:水Vanadium standard
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
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