公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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TB培養(yǎng)基粉劑1L
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1L
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XG-RY1326
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產(chǎn)品名稱:TB培養(yǎng)基粉劑
規(guī)格:1L
貨號:XG-RY1326
儲(chǔ)存條件:室溫,24個(gè)月
用途:質(zhì)粒制備、蛋白質(zhì)表達(dá)
注意事項(xiàng):主要由胰蛋白胨和酵母提取物、磷酸鹽組成,不含瓊脂。如要求無菌,可高壓**15~20min。
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標(biāo)簽。
2 。在校正前,準(zhǔn)備ORP標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分?jǐn)嚢琛?/span>
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分?jǐn)嚢琛?5。 ORP標(biāo)準(zhǔn)液保存期為72hour。
標(biāo)準(zhǔn)品五大類:
1、化學(xué)成分類:標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類:與目錄A相似的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類:以一種或多種物理特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類:以一種或多種工程特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如硬度、拉伸強(qiáng)度和表面特性。
5、其他特性。這些類別又被細(xì)分為三級子類,例如,在化學(xué)成分類中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類中;在化學(xué)成分類別中,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)兩大類;單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準(zhǔn)。
溶液的配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
glycosaminoglycan, GAG Elisa Kit鹽酸法舒地爾Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
glycosaminoglycan, GAG Elisa Kit鹽酸法舒地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
cysteinyl leukotrienes, CysLTs Elisa Kit草質(zhì)素苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
cysteinyl leukotrienes, CysLTs Elisa Kit紅景天素;草質(zhì)素甙;Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
calumenin, CALU Elisa Kit地達(dá)諾辛;去羥肌苷Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
calumenin, CALU Elisa Kit淫羊藿次苷IHuman/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
apoprotein A5, apo-A5 Elisa Kit 寶藿苷II;大花淫羊藿苷A;意卡瑞苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
apoprotein A5, apo-A5 Elisa Kit 槐屬苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Vitamin D-binding protein, DBP Elisa Kit槐屬苷Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Vitamin D-binding protein, DBP Elisa Kit甲基麥冬二氫高異黃酮A,甲基麥冬黃烷酮AHuman/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
selenoprotein 1, SEP1 Elisa Kit甲基麥冬黃烷酮BHuman/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
selenoprotein 1, SEP1 Elisa Kit7,2'-二羥基-3′,4′-二甲氧基異黃烷Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
serum amyloid A3, SAA3 Elisa Kit6aR,11aR)3-羥基-9,10-二甲氧基紫檀烷Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
serum amyloid A3, SAA3 Elisa Kit千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
guanylate nucleotide binding protein 4, Gbp4 Elisa Kit泮托拉唑鈉1.5水合物Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
guanylate nucleotide binding protein 4, Gbp4 Elisa Kit泮托拉唑鈉1.5水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
TB培養(yǎng)基粉劑1LTRIS-HC1緩沖液 英文名稱:TRIS-HC1Buffersolution 含量:IND,80%
Tris平衡苯酚 英文名稱:Tris-Phenol 含量:GR,99.5%
Tris乙磺酸 英文名稱:TES 含量:BR,97%,有害品
VE油 英文名稱:VE 含量:顯色劑
Xmol/L草酸緩沖液 英文名稱:L-OxalateBuffersolution 含量:BR,8%
Xmol/L鹽酸緩沖液 英文名稱:Xmol/L-HydrochloricacidBuffersolution 含量:BR,98%
Yariv′sReagent 英文名稱:Yariv′sReagent 含量:高純,95%
Z-甘氨酰-L-脯氨酰-L-精氨酰對硝基苯胺乙酸鹽 英文名稱:Z-Gly-Pro-ArgPNAacetatesalt 含量:BR,98%
α,α-聯(lián)吡啶 英文名稱:2,2'-Dipyridyl 含量:CP,98.5%
α,α'-聯(lián)喹啉 英文名稱:2,2'-Biquinoline 含量:CP,98%
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;植物細(xì)胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
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