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產(chǎn)品名稱：二磷酸核酮糖羧化酶（Rubisco）比色法檢測(cè)試劑盒100管/96樣
規(guī)格 : 100管/96樣
測(cè)試方法:微量法
商品介紹：
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測(cè)定意義：
核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶（EC 4.1.1.39）是植物光合作用中的一個(gè)關(guān)鍵酶，既控制著CO2的固定，同時(shí)又制約著碳素向Calvin循環(huán)和光呼吸循環(huán)分流，其活性的大小直接影響著光合速率。
測(cè)定原理：
在Rubisco的催化下，1分子的核酮糖-1，5-二磷酸（RuBP）與1分子的CO2結(jié)合，產(chǎn)生2分子的3-磷酸甘油酸（PGA），PGA可通過外加的3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脫氫酶的作用，產(chǎn)生甘油醛-3-磷酸，并使還原型輔酶I（NADH）氧化。因此，340nm吸光度的變化可計(jì)算還原型輔酶I氧化速率，還原型輔酶I氧化速率可反應(yīng)Rubisco的活性。
需自備的儀器和用品：
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
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特點(diǎn)：
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案，1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高，操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)所需的全套試劑
常見樣本處理方法：
1、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
2、細(xì)胞或組織樣品的制備： 培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量
（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議 500萬細(xì)胞加入 1mL提取液） ，超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲 3s，間隔10s，重復(fù)30 次）8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g組織，
加入 1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則：
1、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前，要打開酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。
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髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱：MBP ，MBP，
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dCMP脫氨酶(DCTD)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱：DCTD ，DCTD，
B-細(xì)胞瘤因子9(Bcl9)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱：Bcl9 ，Bcl9，
Cochlin蛋白(COCH)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱：COCH ，COCH，
Atlastin3蛋白(ATL3)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱：ATL3 ，ATL3，
ADP核糖轉(zhuǎn)移酶1(ART1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱：ART1 ，ART1，
Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體G(MHCG)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱：MHCG ，MHCG，
測(cè)定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
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