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產(chǎn)品名稱:己糖激酶(HK)比色法檢測(cè)試劑盒100管/96樣
規(guī)格 : 100管/96樣
測(cè)試方法:微量法
商品介紹:
測(cè)定意義
HK(EC 2.7.1.1)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是葡萄糖分解過程中的個(gè)關(guān)鍵酶,催化葡萄糖轉(zhuǎn)化為6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途徑的交叉點(diǎn)。
測(cè)定原理
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫**NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
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特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量
(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
大黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Barium sulfate纖維母生長(zhǎng)因子5抗體包裝1g
大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benzenesulfonic acid脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1抗體包裝25g
大黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benzoin感覺神經(jīng)蛋白1抗體包裝5g
大黃酸英文名稱: Benzophenone hydrazone線粒體型共濟(jì)失調(diào)蛋白抗體包裝1g
大黃酸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth (III) chlorideFC段IgE受體α多肽抗體包裝1g
大戟因子L1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth (III) citrateFAM81A蛋白抗體包裝250mg
大薊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth (III) potassium iodideFAM78B蛋白抗體包裝25g
大薊苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth (III) sulfate9號(hào)染色體開放閱讀框59抗體包裝5g
大麥芽堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth(III) subcarbonate basicFAM76A蛋白抗體包裝100g
大青葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth(III) subsalicylateFAM76B蛋白抗體包裝1g
大蒜素,二烯基二硫英文名稱: Bismuth, granularFAM92A1蛋白抗體包裝1g
大血藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BNOA-Na, β--Naphthoxyacetic acid sodium saltFAM98A蛋白抗體包裝5g
大葉骨碎樸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Brij 56FRMD5蛋白抗體包裝25g
大葉茜草素英文名稱: Bromochlorophenol blue sodium saltFRMD6蛋白抗體包裝5g
大葉茜草素英文名稱: Bromophenol blue, sodium saltFAM161A蛋白抗體包裝25g
暫無Planktotalea│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品神經(jīng)營養(yǎng)因子3試劑盒5-羥基-6,7-二氧基黃酮;5-Hy
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品神經(jīng)型一氧化氮合成酶試劑盒5-羥基-7,8-二氧基黃酮;5-hy
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品神經(jīng)粘著分子試劑盒去氫荷包牡丹堿;Dehydrodicen
己糖激酶(HK)比色法檢測(cè)試劑盒100管/96樣Rat glucocorticoid receptor, GR D-巖藻糖Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat Luteinizing Hormone-Releasing Hormone, LHRH N-乙酰-DL-絲氨酸Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat Luteinizing Hormone-Releasing Hormone, LHRH 玉米素Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat 8-iso prostaglandin, 8-iso-PG 水飛薊素Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat 8-iso prostaglandin, 8-iso-PG 水飛薊素Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat interferon-inducible protein 16, IFI16/p16 鐵蛋白R(shí)at/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat interferon-inducible protein 16, IFI16/p16 鵝去氧膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat Stromal cell derived factor 1a, SDF-1a 鵝去氧膽酸Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat Stromal cell derived factor 1a, SDF-1a 胰島素(牛)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat alpha-granular membrane protein, GMP-140 胰島素(牛)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat alpha-granular membrane protein, GMP-140 L-天門冬氨酸鉀Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat myeloperoxidase, MPO 輔酶Q10,泛醌Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat myeloperoxidase, MPO 輔酶Q10(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat granzymes B, Gzms-B 維生素A醋酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat granzymes B, Gzms-B 腐植酸,腐殖酸Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat granzymes A, Gzms-A 光萼野百合堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
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