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產(chǎn)品名稱:甲基檸檬酸合酶(MCS)比色法檢測(cè)試劑盒25管/24樣
規(guī)格 : 25管/24樣
測(cè)試方法:可見(jiàn)分光光度法
商品介紹:
測(cè)定意義:
MCS廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體基質(zhì)中,與檸檬酸合酶(CS)共同參與三羧酸循環(huán)的調(diào)節(jié)。
測(cè)定原理:
MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生甲基檸檬酰輔酶A,進(jìn)一步水解產(chǎn)生甲基檸檬酸;該反應(yīng)促使無(wú)色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無(wú)水乙醇和蒸餾水
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特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)所需的全套試劑
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量
(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
八角楓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Strontium chloride, hexhydrate磷酸化埃茲蛋白抗體包裝100mg
八角茴香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium sulfate, dihydrate嗜酸性粒陽(yáng)離子蛋白抗體包裝100mg
八角蓮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: dCMP, 2'-Deoxycytidine 5'-monophosphate, free acidE1A樣分化抑制因子3抗體包裝25mg
八角麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DSS骨骼肌烯化酶抗體包裝1g
巴豆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Adenosine deaminase from calf spleen 15U/mg真核翻譯起始因子2C1抗體包裝25g
巴豆苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Alloxan, monohydrate磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體包裝5g
巴戟天(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium citrate, dibasic附睪蛋白酶抑制蛋白包裝1g
巴利森苷A;派立辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium (L)-lactate, pentahydrate內(nèi)皮素B受體抗體包裝5g
巴西蘇木素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: dTMP, 2'-Deoxythymidine-5'-monophosphate disodium salt大腸桿菌脂多糖抗體包裝1g
芭蕉根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DulcitolGLP1類似蛋白Exendin4抗體包裝5g
菝葜皂苷元,知母皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Melezitose hydrate磷酸化真核翻譯起始因子4B抗體包裝100g
白當(dāng)歸腦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PEG 20000上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體包裝25g
白當(dāng)歸素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Aminothiazole磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝500g
白附子(獨(dú)角蓮)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cerium (III) chloride, heptahydrate磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝1g
白果(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D(+)-Arabitol磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝1g
擬諾卡氏菌Nocardiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格:干品Purity≥98.0%絲氨酸/蘇氨酸激酶24試劑盒人參皂苷Rh3;ginsenoside
米舒青霉Penicillium│miczynskii 質(zhì)量規(guī)格:>65IU/MG,BR絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶試劑盒人參皂苷Rh2;Ginsenoside
: K73/39資源名稱: 巴拿馬沙門(mén)氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP31絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶PAK4試劑盒人參皂苷Rh1;Ginsenoside
甲基檸檬酸合酶(MCS)比色法檢測(cè)試劑盒25管/24樣Rat Angiopoietin 4, ANG-4 1,9-吡唑并蒽酮;SP600125Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat lipolysaccharide binding protein, LBP 別隱品堿;A-別隱品堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat lipolysaccharide binding protein, LBP LGD-4033 Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat alcohol dehydrogenase, ADH 5-溴嘧啶Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat alcohol dehydrogenase, ADH 阿螺旋霉素Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat aldehyde dehydrogenase, ALDH 大豆異黃酮Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat aldehyde dehydrogenase, ALDH 5-溴吲哚 Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat soluble cluster of differentiation 14, sCD14 依魯替尼(PCI32765)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat soluble cluster of differentiation 14, sCD14 右旋蘭索拉唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone, MIS/AMH 右旋蘭索拉唑Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone, MIS/AMH 樂(lè)伐替尼Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat androgen PR171關(guān)鍵中間體I Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat androgen L-甘-異白二肽,甘氨酰-L-異亮氨酸Rat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat Toll-like receptor 4, TLR4 PR171關(guān)鍵中間體IIRat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Rat Toll-like receptor 4, TLR4 PR171關(guān)鍵中間體IIIRat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Rat dopamine transporter, DAT PR171關(guān)鍵中間體IVRat/大鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
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