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產(chǎn)品名稱:乙酰輔酶A比色法檢測試劑盒100管/96樣
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法:微量法
商品介紹:
測定意義
乙酰輔酶A廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。是生物體能源物質(zhì)代謝過程中產(chǎn)生的一種重要的中間代謝產(chǎn)物。在體內(nèi)能源物質(zhì)代謝中是一個(gè)樞紐性的物質(zhì)。糖、脂肪、蛋白質(zhì)三大營養(yǎng)物質(zhì)通過乙酰輔酶A匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化,經(jīng)過這條通路徹底氧化**二氧化碳和水,釋放能量用于ATP合成。此外,乙酰輔酶A是合成脂肪酸,酮體,膽固醇及其衍生物等生理活性物質(zhì)的前體物質(zhì)。
測定原理
蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和NAD**草酰乙酸和NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔酶A和草酰乙酸**檸檬酸和輔酶A。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯(lián)反應(yīng),乙酰輔酶A含量和NADH的**速率成正比,340nm下吸光值的上升速率反應(yīng)了乙酰輔酶A含量的高低。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
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特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量
(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
15-羥基松香酸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sulfamethoxypyridazine早期B因子2抗體包裝5g
16α-Hydroxytrametenolic aci...英文名稱: TCEP; hydrochlorideELAVL2蛋白抗體包裝25g
16α-羥基松苓新酸英文名稱: Sodium thiosulfate, pentahydrateELAVL2+ELAVL4蛋白抗體包裝5g
17-Hydroxy sprengerinin C英文名稱: Sodium iodide同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN1抗體包裝25mg
2''-O-p-反式香豆?;嚥蒈沼⑽拿Q: Starch soluble轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體包裝5mg
2''-O-p-香豆?;登G素英文名稱: Lithium acetate dihydrate谷氨酸受體KA1抗體包裝1g
2''-O-鼠李糖基羊藿次苷II英文名稱: Ficol 400真核翻譯起始因子3K抗體包裝250mg
2'-O-基苦參酮英文名稱: 3,5-Dinitrosalicylic acid早期生長反應(yīng)蛋白3抗體包裝250mg
2,3,5,4-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷,二苯乙烯苷英文名稱: Sodium malonateEMSY蛋白抗體包裝1g
2,3,5,4-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷,二苯乙烯苷(標(biāo)...英文名稱: Sodium phosphate, monobasic, dihydrateFBXO36 F-box蛋白相關(guān)蛋白36抗體包裝25g
2,3-脫氫維酮英文名稱: MalonateCAST1蛋白抗體包裝5g
2,5,9-三羥基-4-氧基-9,10-二氫菲英文名稱: Manganese (II) chloride, tetrahydrateRAB6蛋白抗體包裝1g
20(21)-脫氫赤芝酸A英文名稱: Casein皮卡丘素抗體包裝5g
20(S)-原人參三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: VaselineELAVL4蛋白抗體包裝100g
21-O-順芷酰基匙羹藤新苷元英文名稱: Sodium orthovanadate表皮生長因子樣受體1包裝25g
產(chǎn)黑色鏈霉菌Streptomyces│melanochromogenes 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胎球蛋白A試劑盒薯蕷皂苷元;Diosgenin
亞紅鏈霉菌Streptomyces│subrutilus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR胎盤生長因子試劑盒升麻素苷;Prim-O-glucosyl
豬鏈球菌Streptococcus│suis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胎盤堿性磷酸酶試劑盒松果菊苷;Echinacoside
乙酰輔酶A比色法檢測試劑盒100管/96樣Mouse Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen, PⅠCP 氟米龍Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse soluble P-selectin, sP-selectin 氟米龍(標(biāo)準(zhǔn)品)Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse soluble P-selectin, sP-selectin 阿西美辛Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse Soluble protein-100, S-100 阿西美辛(標(biāo)準(zhǔn)品)Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse Soluble protein-100, S-100 鹽酸氯丙嗪Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse Interleukin 1, IL-1 鹽酸氯丙嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse Interleukin 1, IL-1 地紅霉素Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse Interleukin 1β, IL-1β 地紅霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse Interleukin 1β, IL-1β 對(duì)稱N,N-二甲基精氨酸Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse Myoglobin, MYO/MB 頭孢唑肟鈉Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse Myoglobin, MYO/MB 頭孢唑肟鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse Thromboxane B2, TXB2 焦性沒食子酸,鄰苯三酚,焦棓酸Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse Thromboxane B2, TXB2 曲美替尼Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse acetylcholine, ACH 鹽酸索他洛爾Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse acetylcholine, ACH H-89(PKA抑制劑)Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse Leukotriene B4, LT-B4 夫西地酸Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
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