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產(chǎn)品名稱:NAD蘋果酸酶(NADME)比色法檢測(cè)試劑盒100管/96樣
規(guī)格 : 100管/96樣
測(cè)試方法:微量法
商品介紹:
測(cè)定意義:
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測(cè)定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專一性和對(duì)底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
測(cè)定原理:
NADP-ME催化NADP+還原成NADPH,在340nm下測(cè)定NADPH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
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特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量
(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
極低密度脂蛋白受體(VLDLR)elisa試劑盒英文名稱:VLDLR ELISA Kit錨蛋白重復(fù)域5抗體包裝1g
極低密度脂蛋白(VLDL)elisa試劑盒英文名稱:VLDL ELISA Kit腦鈉通道蛋白2抗體包裝25g
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa試劑盒英文名稱:SDF-1β/CXCL12 ELISA Kit腦鈉通道蛋白4抗體包裝5g
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)elisa試劑盒英文名稱:SDF-1α/SDF1A ELISA Kit小腸鈉通道蛋白5抗體包裝100g
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)elisa試劑盒英文名稱:SDF-1a/CXCL12 ELISA KitAPXL蛋白抗體包裝25g
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)elisa試劑盒英文名稱:TIMP-4 ELISA Kit酸敏感離子通道蛋白3抗體包裝5g
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)elisa試劑盒英文名稱:TIMP-3 ELISA Kit天門冬氨酸β羥化酶抗體包裝1g
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)elisa試劑盒英文名稱:TIMP-2 ELISA Kit精氨酸加壓素受體2抗體包裝250mg
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)elisa試劑盒英文名稱:TIMP-1 ELISA Kit骨架肌動(dòng)蛋白樣蛋白3抗體包裝5g
基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)elisa試劑盒英文名稱:MMP-9/Gelatinase B ELISA Kit膜粘連蛋白8抗體包裝100g
基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)elisa試劑盒英文名稱:MMP-9 ELISA Kit通道蛋白8抗體包裝25g
基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)elisa試劑盒英文名稱:MMP-8 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體包裝500g
基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)elisa試劑盒英文名稱:MMP-7 ELISA Kit凋亡抑制因子5抗體包裝100g
基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)elisa試劑盒英文名稱:MMP-5 ELISA Kit通道蛋白-3抗體包裝25g
基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)elisa試劑盒英文名稱:MMP-4 ELISA Kit載脂蛋白D抗體包裝1g
磷酸化蛋白激酶B抗體抵抗素(RETN)AMD 3465 hexahydrobromide (GENZ-644494 hexahydrobromide) 是一種有效的 CXCR4 拮抗劑,在 SupT
NAD蘋果酸酶(NADME)比色法檢測(cè)試劑盒100管/96樣Cyclin-D2 桿菌肽鋅Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Cyclin-D2 鹽酸貝那普利/苯那普利Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Cyclin-D1 鹽酸貝那普利/苯那普利(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Cyclin-D1 苯扎貝特Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Endostatin, ES 苯扎貝特(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Endostatin, ES 布南色林Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
ferritin, FE 溴夫定Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
ferritin, FE 溴夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
microtransferrinuria, MTF 卡巴他賽Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
microtransferrinuria, MTF 米托蒽醌Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
tissue inhibitor of metal protease 1, TIMP-1 拉莫三嗪 Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
tissue inhibitor of metal protease 1, TIMP-1 拉莫三嗪 (標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
myelin basic protein autoantibody, MBP D-半乳糖醛酸Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
myelin basic protein autoantibody, MBP D-半乳糖醛酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Tissue Polypeptide Antigen, TPA 骨化三醇Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Tissue Polypeptide Antigen, TPA 坎地沙坦酯Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
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