產(chǎn)品名稱:NAD激酶(NADK)比色法檢測(cè)試劑盒100管/48樣
規(guī)格 : 100管/48樣
測(cè)試方法:微量法
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商品介紹:
測(cè)定意義:
NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化**NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無(wú)機(jī)多聚磷酸[poly(P)]作為磷?;w進(jìn)行磷酸化反應(yīng),**NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調(diào)節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。
測(cè)定原理:
NADK催化NAD+磷酸化,**NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過(guò)PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(lán)(MTT),通過(guò)在600 nm下測(cè)定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
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特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)所需的全套試劑
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量
(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
腦啡肽原B(PDYN)elisa試劑盒英文名稱:PDYN ELISA Kit乙脫氫酶2型抗體包裝5g
腦啡肽原A(PENK)elisa試劑盒英文名稱:PENK ELISA Kitγ-氨基丁酸脫氫酶抗體包裝1g
腦腸肽(Gehrelin)elisa試劑盒英文名稱:Gehrelin ELISA Kit衰老相關(guān)蛋白5抗體包裝25g
腦腸肽(BGP/Gehrelin)elisa試劑盒英文名稱:BGP/Gehrelin ELISA Kit磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體包裝5g
末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)elisa試劑盒英文名稱:TCC C5b-9 ELISA Kit釉基質(zhì)蛋白抗體包裝1g
膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa試劑盒英文名稱:ANX-Ⅴ ELISA Kit磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體包裝25g
繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管**(AMH)elisa試劑盒英文名稱:AMH ELISA Kit磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體包裝5g
苗條素受體(LR/Ob-R)elisa試劑盒英文名稱:LR/Ob-R ELISA Kit磷酸化雄**受體抗體包裝1g
**球蛋白M(IgM)elisa試劑盒英文名稱:IgM ELISA Kit磷酸化雄**受體抗體包裝5g
**球蛋白G4(IgG4)elisa試劑盒英文名稱:IgG4 ELISA Kit磷酸化雄**受體抗體包裝1g
**球蛋白G2(IgG2)elisa試劑盒英文名稱:IgG2 ELISA Kit磷酸化雄**受體抗體包裝5g
**球蛋白G1(IgG1)elisa試劑盒英文名稱:IgG1 ELISA Kit錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激酶ANKK1抗體包裝1g
**球蛋白G(IgG)elisa試劑盒英文名稱:IgG ELISA Kit磷酸化內(nèi)收蛋白抗體包裝25g
**球蛋白E(IgE)elisa試劑盒英文名稱:IgE ELISA Kit膜粘連蛋白11抗體包裝5g
**球蛋白D(IgD)elisa試劑盒英文名稱:IgD ELISA Kit膜粘連蛋白13抗體包裝100mg
肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體**球蛋白G(IgG)Torezolid (TR-701; tedizolid) is a novel oxazolidinone for gram-positive infecti
NAD激酶(NADK)比色法檢測(cè)試劑盒100管/48樣mucin-5 subtype B, MUC5B 硫酸長(zhǎng)春新堿/硫酸醛基長(zhǎng)春堿Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
mucin-5 subtype B, MUC5B 硫酸長(zhǎng)春新堿/硫酸醛基長(zhǎng)春堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Intestinal trefoil factor, ITF 帕唑帕尼Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Intestinal trefoil factor, ITF 非洛地平/非氯地平Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Dickkopf 1, DKK1 非洛地平(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Dickkopf 1, DKK1 6-硫鳥(niǎo)嘌呤(進(jìn)分)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Kallikrein 11, KLK 11 6-硫鳥(niǎo)嘌呤Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Kallikrein 11, KLK 11 6-硫鳥(niǎo)嘌呤(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
growth-regulated oncogeneγ/melanoma growth stimulating activity, GROγ/MGSA 維A酸;全反式維A酸;維生素A酸;視黃酸Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
growth-regulated oncogeneγ/melanoma growth stimulating activity, GROγ/MGSA 維A酸;(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
growth-regulated oncogeneβ/melanoma growth stimulating activity, GROβ/MGSA 比卡魯胺Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
growth-regulated oncogeneβ/melanoma growth stimulating activity, GROβ/MGSA 比卡魯胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
caenorhabditis elegans death gene, CED-3 白消安Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
caenorhabditis elegans death gene, CED-3 白消安(標(biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
thymus-leukemia antigen, TLa 洛莫司汀Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
thymus-leukemia antigen, TLa 洛莫司?。?biāo)準(zhǔn)品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
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