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產品名稱:NADP蘋果酸脫氫酶(NADPMDH)比色法檢測試劑盒100管/96樣
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法:微量法
商品介紹:
測定意義:
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH, NADP-MDH主要存在于真核細胞中。
測定原理:
NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸**蘋果酸,導致340nm處光吸收下降。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
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特點:
1、優(yōu)化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數(shù)量
(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
乙型肝炎e抗原(HBeAg)elisa試劑盒英文名稱:HBeAg ELISA KitADCK1蛋白抗體包裝25g
乙型肝炎e抗體(HBeAb)elisa試劑盒英文名稱:HBeAb ELISA Kit?;o酶A結合結構域蛋白4抗體包裝5g
乙酰輔酶A(acetyl-CoA)elisa試劑盒英文名稱:acetyl-CoA ELISA Kitα/β解酶4抗體包裝1g
乙酰膽堿轉移酶(CHAT)elisa試劑盒英文名稱:CHAT ELISA KitADCK2蛋白抗體包裝250mg
乙酰膽堿酯酶(AchE)elisa試劑盒英文名稱:AchE ELISA Kit乙脫氫酶16家庭A1抗體包裝1g
乙酰膽堿受體抗體(AChRab)elisa試劑盒英文名稱:AChRab ELISA Kit粘附分子IgG樣結構域蛋白3抗體包裝1g
乙酰膽堿(ACH)elisa試劑盒英文名稱:ACH ELISA Kit乙脫氫酶1抗體包裝250mg
胰脂肪酶(PL)elisa試劑盒英文名稱:PL ELISA Kitδ氨基乙酰酸脫酶抗體包裝1g
胰激肽原酶(PK)elisa試劑盒英文名稱:PK ELISA Kit肌側索硬化癥相關蛋白4抗體包裝500mg
胰高血糖素樣肽2(GLP-2)elisa試劑盒英文名稱:GLP-2 ELISA Kitα2巨球蛋白(α-2M)抗體包裝250mg
胰高血糖素樣肽1(GLP-1)elisa試劑盒英文名稱:GLP-1 ELISA KitACCSL蛋白抗體包裝500mg
胰高血糖素(GC)elisa試劑盒英文名稱:GC ELISA Kit胎蛋白抗體包裝100mg
胰淀素(Amylin)elisa試劑盒英文名稱:Amylin ELISA Kitβ淀粉樣前體蛋白結合蛋白3抗體包裝25g
胰島細胞抗體(ICA)elisa試劑盒英文名稱:ICA ELISA Kit星形肌動蛋白抗體包裝1g
胰島素自身抗體(IAA)elisa試劑盒英文名稱:IAA ELISA Kit系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體包裝5g
激活素受體2A抗體胱天蛋白酶14(CASP14)Selumetinib (AZD6244) is a potent, highly selective MEK1 inhibitor with IC50 of
NADP蘋果酸脫氫酶(NADPMDH)比色法檢測試劑盒100管/96樣thymic stromal lymphopoietin, TSLP 克拉霉素(標準品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
thymic stromal lymphopoietin, TSLP 克林霉素磷酸酯Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Perforin/Pore-forming protein, PF/PFP 克林霉素磷酸酯(標準品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Perforin/Pore-forming protein, PF/PFP 克羅拉濱/氯法拉濱Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
pleiotrophin, PTN 克霉唑Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
pleiotrophin, PTN 克霉唑(標準品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
soluble cluster of differentiation 28, sCD28 秋水仙堿Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
soluble cluster of differentiation 28, sCD28 秋水仙堿(標準品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
lymphocyte factor 硫酸粘桿菌素,多粘菌素E硫酸鹽Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
lymphocyte factor 硫酸粘桿菌素(標準品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
thymus activation regulated chemokine, TARC 鹽酸依氟鳥氨酸Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
thymus activation regulated chemokine, TARC 色甘酸鈉Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Neural cell adhesion molecule ligand 1, NCAM-L1 色甘酸鈉(標準品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Neural cell adhesion molecule ligand 1, NCAM-L1 環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素AHuman/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Cobra venom neuronal protective factor, CVNPF 環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A(標準品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Cobra venom neuronal protective factor, CVNPF 鹽酸噻氯匹定Human/人Elisa試劑盒規(guī)格:96T
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。
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