儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
產(chǎn)品名稱:靴菌保存
拉丁文: Crepidotus│sp.
提供形式: 斜面培養(yǎng)物
**等級: 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 14
生長條件: 25-28℃
存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
低溫存法:產(chǎn)品僅用于科研
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
脫水存法:
①沙土保存法,能產(chǎn)孢子、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經(jīng)稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內(nèi),裝置高度為1cm;2~3次,烘干后即可將在斜面培養(yǎng)基上生長良好的孢子,用無菌蒸餾水2~2.5ml制成孢子懸液,吸取少許加入沙土管中,經(jīng)真空抽干,外觀呈松散狀態(tài),于4℃冰箱保存,保存期可達5~7年。
② 冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護劑(一般用脫脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管內(nèi)于-20~-30℃的乙醇浴中速凍。然后,在低溫下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽結(jié)凍,熔封安瓿管,于低溫下保存。保存期可達5~10年之久。
③ 石蠟油封存法,在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上后的石蠟油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低溫干燥處保存,此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物,保存期為一年以上。
菌種的使用范圍:
(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚,釀酒酵母菌組成成分,重復(fù)性強,而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等。
(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)。這類培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營養(yǎng)豐富,培養(yǎng)效果好,所以常被采用。
(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無機鹽類,或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
靴菌保存 ⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
野油菜黃單胞菌(甘藍黑腐病黃單胞菌,野油菜桿菌) Xanthomonas
campestris
芽胞菌 Bacillus sp.
嗜線蟲致病桿菌 Xenorhabdus nematophila
東方擬無枝酸菌 Amycolatopsis orientalis
小鼠黑色素瘤瘤株;B16
EDA2R Others Mouse 小鼠 XEDAR / EDA2R 細胞裂解液 (陽性對照)
血管內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
D341Med細胞,髓母細胞瘤細胞 藤黃微球菌/騰黃八疊球菌 貓腎細胞;CRFK
CCL3 Protein Mouse 重組小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白
NIH/3T3(小鼠胚胎細胞) 5×106cells/瓶×2 EVI2A 細胞裂解液 (陽性對照)
超低分子量蛋白Marker III(3.0kd) 次 5-BenzylH-tetrazole1848955-芐基H-四唑
超低分子量蛋白Marker IV(3.35kD) 次 5-Benzyl
N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate135743N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-芐酯
低分子量蛋白Marker II(14.416KD) 次 5-Benzyl
L-glutamate16763L-谷氨酸5-芐酯
低分子量蛋白質(zhì)Marker I (14.47.4kD) 次 5-Benzyl D-glutamate25783D-谷氨酸5-苯甲酯
高分子量蛋白Marker(KD) 次 5-Benzoylpentanoic acid414425-苯甲?;焖?span lang="EN-US">
人巨噬細胞集落刺激因子(MCSF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:M-CSF, CSF1, CSF-1 Human MCSF(Macrophage Colony
Stimulating Factor 1) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組MCSF濃度