儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
產(chǎn)品名稱:異孢單頂孢規(guī)格
拉丁文: Monacrosporium│heterosporum
分離基物: 土壤
提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物
**等級: 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 18
生長條件: 28℃
存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法
低溫存法:產(chǎn)品僅用于科研
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
脫水存法:
①沙土保存法,能產(chǎn)孢子、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經(jīng)稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內(nèi),裝置高度為1cm;2~3次,烘干后即可將在斜面培養(yǎng)基上生長良好的孢子,用無菌蒸餾水2~2.5ml制成孢子懸液,吸取少許加入沙土管中,經(jīng)真空抽干,外觀呈松散狀態(tài),于4℃冰箱保存,保存期可達5~7年。
② 冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護劑(一般用脫脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管內(nèi)于-20~-30℃的乙醇浴中速凍。然后,在低溫下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽結(jié)凍,熔封安瓿管,于低溫下保存。保存期可達5~10年之久。
③ 石蠟油封存法,在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上后的石蠟油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低溫干燥處保存,此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物,保存期為一年以上。
菌種的使用范圍:
(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學成分清楚,釀酒酵母菌組成成分,重復性強,而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等。
(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)。這類培養(yǎng)基的化學成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營養(yǎng)豐富,培養(yǎng)效果好,所以常被采用。
(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機物的基礎(chǔ)上適當加入已知成分的無機鹽類,或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
異孢單頂孢規(guī)格 種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
宛氏擬青霉 Paecilomyces variotii
美味絲葚霉 Papulaspora sapidus
小麥紋枯病菌 Pellicularia gramineum
黃灰青霉 Penicillium aurantiogriseum
細胞
TSLP Others Mouse 小鼠 TSLP 細胞裂解液 (陽性對照)
G422瘤 神經(jīng)膠質(zhì)瘤
LS 174T結(jié)腸腺癌細胞 LS 174T human colon
adenocarcinoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
TNFSF9 Protein Rat 重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (His 標簽)
卵巢上皮細胞(HOSEpiC) ( 5×105 ) Caco-2,結(jié)直腸腺癌細胞 Human
SMCC0mgTolazoline 597鹽酸妥拉唑林
Sulfo-SMCCmgMeclizine 142鹽酸美克洛嗪
3-Maleimidopropionic acid N-hydroxysuccinimide
ester0mg6-(5-Chloropyridin-yl)-hydroxy,7-dihydroH-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-one41
Fluorescein-maleimide25mg佐匹克隆
Tetramethylrhodamine-(and)-maleimide *Mixed
isomers*25mgCapecitabine 2',3'-diacetate162
人角蛋白10(KRT10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:CK10, K10, Cytokeratin-10, Keratin-10, EHK, KPP,
BCIE, BIE Human KRT10(Keratin, Type I Cytoskeletal 10) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組KRT10濃度
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