產(chǎn)品名稱(chēng):肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種保存
拉丁文: Klebsiella pneumoniae ssp pneumoniae
提供形式: 凍干物
**等級(jí): 2
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 研究;教學(xué);分類(lèi)。
培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。
生長(zhǎng)條件: 37℃,好氧
生長(zhǎng)特性: 革蘭氏陰性直桿菌,0.3-1.0×0.6-6.0μm,單個(gè)、成對(duì)或短鏈,有莢膜,無(wú)動(dòng)力,兼性厭氧
培養(yǎng)及打管說(shuō)明:
1、安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
使用說(shuō)明書(shū):
復(fù)蘇菌種前需先準(zhǔn)備好適用于該菌生長(zhǎng)的固體、液體培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備,以形成無(wú)菌的操作環(huán)境。
開(kāi)啟之前,先用75%酒精棉試管表面,按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)瓶蓋和膠塞,加入0.3ml左右的配套液體培養(yǎng)基,用無(wú)菌滴管反復(fù)吹吸,將凍干菌種溶解為懸液,然后用無(wú)菌滴管或接種環(huán)移至斜面、平板或液體培養(yǎng)基,并連同剩余菌懸液的試管一起放置于36℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
次日觀察菌種的生長(zhǎng)情況,如未生長(zhǎng),應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)24h,或吸取培養(yǎng)之后的試管剩余菌懸液再次接種培養(yǎng),培養(yǎng)24小時(shí)觀察。
菌株為一次性使用品,暫不開(kāi)啟的菌種應(yīng)在4℃環(huán)境下保存。
復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代以后使用,建議菌種使用5代后棄用。
綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
前期準(zhǔn)備:(A)處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
按比例配制培養(yǎng)材料;
導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
保藏方法:
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧**用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法產(chǎn)品僅用于科研
肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種保存先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。
豬苓
猴頭菌
醬油曲霉
土曲霉
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S5
DKKL1 Others Human
DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL
SW620-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)結(jié)腸癌細(xì)胞 SW620-EGFP-puro
(leiviral consuct stable sain) in human colon cancer cells L-15+10%Hyclone 滅清+2μg/ml puromycin
IL13 Protein Human 重組 IL13 / ALRH 蛋白
齒齦成纖維細(xì)胞 (HGF)( 5×105 ) RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元 Rattus
IPTG溶液5ml3-(5-(2-Aminopropyl)-cyanoindolin-yl)propyl benzoate (2R,3R),3-dihydroxysuccinate2394635
Kanamycin solution 卡那霉素溶液 mg/ml5×1ml3-(4-Chlorobutyl)indole-carbonitrile1436129
Leupeptin 0×亮抑酶肽溶液1ml
3-(3-Chloropropyl),3-dihydro,8-dimethoxyH-benzazepin-one851759
Lysozyme solution 溶菌酶 5mg/ml5×1ml3-(2-Benzothiazolylthio)propionic
acid4763-(2-苯并噻唑基硫代)
N6-異戊烯基腺嘌呤核苷溶液(2ip riboside)5×1ml3-(1-Piperazinyl),2-benzisothiazole876917
人細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱(chēng):CD54 Human ICAM-1(intercellular adhesion molecule 1)
ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組ICAM-1濃度
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