實驗要點:
1.產品名稱如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價結合;
7.交聯(lián)反應后,應充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結合產生競爭作用;
8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。
應用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實驗,質量保證,無效免費退換,另外本公司長期供應化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗所需全部相關試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體。
產品名稱
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規(guī)格
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貨號
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Anti-PAK4抗體
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0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
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XG-01K86190
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英文名稱 Anti-PAK4
中文名稱 p21激活激酶4抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit
產品類型 一抗
研究領域 腫瘤 細胞生物 學 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節(jié)因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 64kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PAK4
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 p21 activated kinase 4; p21(CDKN1A) activated kinase 4; PAK 4; Protein kinase related to S.cerevisiae STE20 effector for Cdc42Hs; Serine threonine kinase PAK 4; Serine/threonine protein kinase PAK 4; Serine/threonine protein kinase PAK4; KIAA1142; PAK4_HUMAN.
稀釋方法:
方法1. 實驗前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩(wěn)定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時不需抗原修復這一步。缺點是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構,可能會使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時,目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優(yōu)點可以保持組織細胞的形態(tài)結構,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
抗體的鑒定:產品僅用于科研
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
n-Butyl-β-D-fructopyranoside 67884-27-9 中文名: 分子式:C10H20O6 Human plasminogen activator (PLGA) ELISA Kit 人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒
3'-Hydroxygynuramide II 1401093-57-9 中文名: 分子式:C42H83NO6 Humanai-IgEreceptoraibodyELISAKit 人抗IgE受體抗體ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Senkyunolide S 172723-28-3 中文名: 分子式:C12H16O5 Humandenguefeveraibody,DFELISA試劑盒人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Senkyunolide R 172549-37-0 中文名: 分子式:C12H16O5 組織JNK3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Senkyunolide E 94530-83-3 中文名: 分子式:C12H12O3 Humanplacealribonucleaseinhibitor,HPRIELISAKit人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
靈芝酸G HPLC≥98% 20mg 人巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)試劑盒 Human MIP-3β ELISA kit
靈芝烯酸D HPLC≥98% 10mg Ratalcoholdehydrogenase,ADHELISAKit大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
靈芝烯酸E HPLC≥98% 5mg 載玻片細胞αSMA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20
硫秋水仙苷 HPLC≥98% 20mg Mouse5-Nucleotidase,5-ELISA試劑盒小鼠5核苷酸酶(5-)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硫酸氨基葡萄糖 HPLC≥98% 20mg 小鼠脂蛋白關聯(lián)0脂酶A2(LpPLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: LpPLA2 ELISA Kit
硫酸長春堿 HPLC≥98% 20mg 基質金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA檢測試劑盒Monkeymaixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit 96T/48T
硫酸長春新堿 HPLC≥98% 20mg 犬凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)試劑盒 Canine thrombin-aithrombin complex,TAT ELISA Kit
硫酸長春質堿 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP3ELISAKIT人胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)規(guī)格:96T/48T
硫酸黃連堿 HPLC≥98% 20mg 化人體RUNX3基因重組表達載體(pcDNA-RUNX3)測序引物對2OD
硫酸金雀花堿 HPLC≥98% 20mg RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISA試劑盒大鼠透明質酸結合蛋白(HABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
異海松烯,二醇 HPLC≥98% 5mg Rat macrophage inflammatory protein 3 beta (MIP-3 beta /ELC/CCL19) ELISA Kit 大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒
貝殼杉烯,,三醇 HPLC≥98% 5mg Rat macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒
羥基漿果赤霉素 III H
Anti-PAK4抗體體液肌酸激酶同工酶腦型(CK--BB)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 20次
細胞肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性比色法定量檢測試劑盒 25次
組織肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性比色法定量檢測試劑盒 25次
體液肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性比色法定量檢測試劑盒 25次
細胞肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 20次
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