抗體的鑒定:產(chǎn)品僅用于科研
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力。抗體的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
人糖抗原125(CA125)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:MUC16, Mucin 16 Human CA125(Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組CA125濃度
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號(hào)
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Anti-STAT3西格抗體
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0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
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XG-01K87972
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英文名稱 Anti-STAT3
中文名稱 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, Guinea Pig
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 發(fā)育生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 88kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human STAT3 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 1110034C02Rik; Acute Phase Response Factor; APRF; AW109958; DNA binding protein APRF; FLJ20882; HIES; MGC128731; MGC16063; MGC93551; Signal transducer and activator of transcription 3 (acute-phase response factor); Signal transducer and activator of transcription 3; Signal Transductor and Activator of Transcription 3; STAT 3; Transcription factor; STAT3_HUMAN.
稀釋方法:
方法1. 實(shí)驗(yàn)前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復(fù)凍溶。
方法2. 實(shí)驗(yàn)前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預(yù)試驗(yàn)可做幾個(gè)梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個(gè)好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請(qǐng)教得出的結(jié)論。因?yàn)樽魇炃衅瑫r(shí)要高溫烤片,可能會(huì)破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩(wěn)定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。缺點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),可能會(huì)使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮。當(dāng)你買一抗時(shí),目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫著兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn):
1.產(chǎn)品名稱如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對(duì) 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合;
7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會(huì)對(duì)生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)作用;
8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對(duì)某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。
頭孢氨芐(標(biāo)準(zhǔn)品) Cephalexin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠腦素/腦尿肽(BNP)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 96T/48T
赤霉素GA3 Gibberellic acid(GA3 ) 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR 人鈣蛋白酶2(M/II)大亞基(CAPN2)(CAPN2)試劑盒 Human CAPN2 ELISA kit
氯霉素 Chloramphenicol 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR RatIerleukin17,IL-17ELISAKit大鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氯霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) Chloramphenicol 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 CASPASE-7蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
氯霉素(植物細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)) Chloramphenicol 質(zhì)量規(guī)格:>99%,用于植物細(xì)胞培養(yǎng) MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
阿魏酸鈉 ferulic 質(zhì)量規(guī)格:>99% 小鼠趨化素(CHEM)ELISA試劑盒 ,英文名: CHEM ELISA Kit
阿魏酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) ferulic 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%(干品),標(biāo)準(zhǔn)品 豬可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA檢測(cè)試劑盒PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 96T/48T
頭孢妥侖匹酯 Cefditoren pivoxil 質(zhì)量規(guī)格:>950μg/mg,BR 大鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒 Rat Tumor necrosis factor α ,TNF-α ELISA kit
頭孢妥侖匹酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefditoren pivoxil 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定 英文名稱HumanAILR1(h)ELISAKIT人AILR1規(guī)格:96T/48T
吡嗪酰胺 Pyrazinamide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP 動(dòng)物組織鈣ATP酶(Ca++-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
Proquinazid,10ng/ul 標(biāo)準(zhǔn)品 2,3,4,5-Tetrachlorophenol 10ng/ul于環(huán)己烷,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)
拿草特 標(biāo)準(zhǔn)品 2,3,4,5-Tetrachlorophenol 10ng/ul于環(huán)己烷,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)
Propoxycarbazone sodium,10ng/ul 標(biāo)準(zhǔn)品 2,3,4,5-Tetrachloronitrobenzene 10ng/ul于乙腈,10ML 特征形態(tài) 液態(tài)
Anti-STAT3西格抗體3,4-O-Isopropylidene shikimic acid 183075-03-8 中文名: 分子式:C10H14O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠胰島素原(PI)ELISAKit
3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one 1220891-22-4 中文名: 分子式:C10H10O3 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 四氫
應(yīng)用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實(shí)驗(yàn),質(zhì)量保證,無效免費(fèi)退換,另外本公司長(zhǎng)期供應(yīng)化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體。
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