抗體的鑒定:產(chǎn)品僅用于科研
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
人鐵調(diào)素25(Hepc25)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:Hepc25, Hepcidin-25 Human Hepc25(Hepcidin 25) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組Hepc25濃度
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號(hào)
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Anti-SREBP-1西格抗體
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0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
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XG-01K87988
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英文名稱 Anti-SREBP-1
中文名稱 膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 合成與降解
蛋白分子量 predicted molecular weight: 126kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SREBP-1 N-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 Sterol regulatory element binding protein 1; ADD 1; BHLHD1; D630008H06; SREBF 1; SREBF1; SREBP 1; SREBP1; SREBP 1c; Sterol regulatory element binding protein 1; Sterol Regulatory Element Binding Transcription Factor 1 / Protein 1; Sterol regulatory element binding transcription factor 1.
稀釋方法:
方法1. 實(shí)驗(yàn)前,將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復(fù)凍溶。
方法2. 實(shí)驗(yàn)前,也可將凍干粉抗體用無(wú)菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預(yù)試驗(yàn)可做幾個(gè)梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個(gè)好的稀釋比例,再正式做,工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請(qǐng)教得出的結(jié)論。因?yàn)樽魇炃衅瑫r(shí)要高溫烤片,可能會(huì)破壞組織的抗原 性,如果組織的抗原性較穩(wěn)定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。
(2)冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原活性,做化 時(shí)不需抗原修復(fù)這一步。缺點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),可能會(huì)使抗原彌散;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒(méi)石蠟的漂亮。當(dāng)你買(mǎi)一抗時(shí),目錄上都寫(xiě)著做什么樣的切片,如果它寫(xiě)著只能做冰凍,就不能做石蠟,如寫(xiě)著兩者都可,那就都能做。
(3)石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,一定要存在-80度的低溫冰箱中,尤其是用來(lái)做原位雜交 的的切片,為了防止RNA降解,保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,容易成功,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn):
1.產(chǎn)品名稱如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對(duì) 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選適條件;
3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合;
7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會(huì)對(duì)生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)作用;
8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對(duì)某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。
甲巰咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Methimazole 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 96T/48T
枸櫞酸氯米芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Clomiphene 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 大鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒 Rat cyclophilin A,CyPA ELISA Kit
甲磺酸雙氫毒堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Dihydroergotoxine mesylate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 英文名稱Ratheatshockprotein60ELISAKit大鼠熱休克蛋白60(Hsp60)規(guī)格:96T/48T
6-醛基異麥冬黃烷酮A(標(biāo)準(zhǔn)品) 6-Aldehydoisoophiopogonanone A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 活化凝血因子8(FACTORVIIIa)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20
氯普噻噸(標(biāo)準(zhǔn)品) Chlorprothixene 質(zhì)量規(guī)格:檢查 ELISAKitCMLC-1人心肌肌凝蛋白輕鏈1規(guī)格:48T/96T
氯普噻噸 Chlorprothixene 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠谷酰胺合成酶(GS)ELISA試劑盒 ,英文名: GS ELISA Kit
咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Imidazole 質(zhì)量規(guī)格:檢查 人酶2(CA-2)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit 96T/48T
瑞他帕林;瑞他莫林 Retapamulin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)試劑盒 Rat Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit
乳果糖(標(biāo)準(zhǔn)品) Lactulose 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 英文名稱Ratheatshockprotein60ELISAKit大鼠熱休克蛋白60(Hsp60)規(guī)格:96T/48T
酞丁安(標(biāo)準(zhǔn)品) FTIBAMZONE 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定 活化凝血因子9(FACTORIXa)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
2-辛酮 標(biāo)準(zhǔn)品 2-Octanone 111-13-7 純品型,1ML 特征形態(tài) 固態(tài)
2-辛醇 標(biāo)準(zhǔn)品 Malonicacid(Propanedioicacid) 123-96-6 純品型,1ml 特征形態(tài) 固態(tài)
辛醇 標(biāo)準(zhǔn)品 Dimefluthrin 111-87-5 純品型,1ML 特征形態(tài) 固態(tài)
Anti-SREBP-1西格抗體Brinzolamide 138890-62-7 中文名:布林佐胺 分子式:C12H21N3O5S3 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒
Tetraethyl ranelate 58194-26-6 中文名: 分子式:C20H26N2O8S 人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISAKit
3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt 219
應(yīng)用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等實(shí)驗(yàn),質(zhì)量保證,無(wú)效免費(fèi)退換,另外本公司長(zhǎng)期供應(yīng)化抗體、WB抗體、化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體。
- 溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買(mǎi)風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買(mǎi)前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
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