產(chǎn)品名稱:乙酰膽堿酯酶染色液
規(guī)格:2×20ml
貨號:XG-RY1682
儲存條件:—20℃,避光,6個月
用途:乙酰膽堿酯酶染色
注意事項:主要由碘化乙酰硫代膽堿、硫酸銅等組成。酶活性部位為棕色沉淀。
公司產(chǎn)品僅供科研實驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱
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貨號
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乙酰膽堿酯酶染色液2×20ml
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2×20ml
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XG-RY1682
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溶液的配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類:
1、化學成分類:標準物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動物脂肪),以一種或多種化學或物理化學特性值表征。
2、生物和臨床特性類:與目錄A相似的標準物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類:以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì),如熔點、粘性和密度。
4、工程特性類:以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類別又被細分為三級子類,例如,在化學成分類中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量??征的鋁合金,列于化學成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類中;在化學成分類別中,標準物質(zhì)還可進一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類;單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點、熔化焓值、粘度、紫外可見光吸光率、閃點等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。
唾液酸轉(zhuǎn)移酶1(SIAT1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:SIAT1 ELISA Kit,SIAT1,
頭蛋白(NOG)elisa檢測試劑盒 英文名稱:NOG ELISA Kit,NOG,
糖原蛋白2(GYG2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:GYG2 ELISA Kit,GYG2,
酶Ⅰ(CA1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CA1 ELISA Kit,CA1,
髓鞘型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP8)elisa檢測試劑盒 英文名稱:FABP8 ELISA Kit,F(xiàn)ABP8,
絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶1(MAP3K1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:MAP3K1 ELISA Kit,MAP3K1,
絲氨酸/蘇氨酸激酶39(STK39)elisa檢測試劑盒 英文名稱:STK39 ELISA Kit,STK39,
輸出蛋白7(XPO7)elisa檢測試劑盒 英文名稱:XPO7 ELISA Kit,XPO7,
矢車菊苷β1(CENTβ1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CENTβ1 ELISA Kit,CENTβ1,
載脂蛋白B(APOB)elisa檢測試劑盒 英文名稱:APOB ELISA Kit,APOB,
抑制蛋白β2(ARRβ2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ARRβ2 ELISA Kit,ARRβ2,
原鈣黏素α13(PCDHα13)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PCDHα13 ELISA Kit,PCDHα13,
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)elisa檢測試劑盒 英文名稱:IGFBP4 ELISA Kit,IGFBP4,
延長蛋白3(ELP3)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ELP3 ELISA Kit,ELP3,
血小板親和蛋白2(PKP2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PKP2 ELISA Kit,PKP2,
血管**素樣蛋白2(ANGPTL2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ANGPTL2 ELISA Kit,ANGPTL2,
胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)elisa檢測試劑盒 英文名稱:TARC ELISA Kit,TARC,
乙酰膽堿酯酶染色液2×20ml阿斯巴甜標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Aspartame
5-氨基-3-羧基-2,4,6-三碘-N-甲基苯甲酰胺標準品
規(guī)格:50mg 英文名稱:
丙二醇二月桂酸酯標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Propylene Glycol Dilaurate
碘他拉酸標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Iothalamic Acid
莰烯氯噻嗪標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Cyclothiazide (AS)
凱迪恩標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱:KDN
巴氯芬相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Baclofen Related Compound A
二氟尼柳標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Diflunisal
別嘌醇相關(guān)物質(zhì)B標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
戊酸倍他米松相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
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