公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號(hào)
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SA緩沖液500ml
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500ml
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XG-RY2110
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產(chǎn)品名稱:SA緩沖液
規(guī)格:500ml
貨號(hào):XG-RY2110
儲(chǔ)存條件:4℃,12個(gè)月
用途:**毒理實(shí)驗(yàn)中血清等樣品稀釋*常用的試劑。
注意事項(xiàng):主要由氯化鈉、氯化鈣、氯化鎂、碳酸氫鈉等組成。用蒸餾水稀釋至1×后使用,稀釋液應(yīng)在12h內(nèi)使用。
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標(biāo)簽。
2 。在校正前,準(zhǔn)備ORP標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分?jǐn)嚢琛?/span>
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分?jǐn)嚢琛?5。 ORP標(biāo)準(zhǔn)液保存期為72hour。
標(biāo)準(zhǔn)品五大類:
1、化學(xué)成分類:標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類:與目錄A相似的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類:以一種或多種物理特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類:以一種或多種工程特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如硬度、拉伸強(qiáng)度和表面特性。
5、其他特性。這些類別又被細(xì)分為三級(jí)子類,例如,在化學(xué)成分類中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類中;在化學(xué)成分類別中,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)兩大類;單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準(zhǔn)。
溶液的配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
[Phe17]-Apelin 17Lys-Phe-Arg-Arg-Gln-Arg-Pro-Arg-Leu-Ser-His-Lys-Gly-Pro-Met-Pro-Phe
[Phe2, Nle4]-ACTH (1-24)Ser-Phe-Ser-NLE-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-Arg-Arg-Pro-Val-Lys-Val-Tyr-Pro
[Phe2,Orn8]-OxytocinCys-Phe-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Orn-Gly- NH2 (Disulfide bridge:Cys1-Cys6)
[Phe2]-TRHPyr-Phe-Pro- NH2
[Phe22] Big Endothelin-1 (19-37), humanIle-Ile-Trp-Phe-Asn-Thr-Pro-Glu-His-Val-Val-Pro-Tyr-Gly-Leu-Gly-Ser-Pro-Arg
[Phe4]-Dermorphin (1-4) amideTyr-D-Ala-Phe-Phe-NH2
[Phe7] Dynorphin A (1-7), amide, porcineTyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Phe- NH2
[Phe7] Dynorphin A (1-7), porcineTyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Phe
[Pro18, Asp21] β-Amyloid (17-21), iAb5Leu-Pro-Phe-Phe-Asp
[Pro34]-Neuropeptide Y (porcine)Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Leu-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Ile-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr- NH2
[Pro34]-Neuropeptide Y, human, rat; [Pro34]-NPY, human, ratTyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Met-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Ile-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr- NH2
Anti-USF-1/FITC 熒光素標(biāo)記上游刺激因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
調(diào)節(jié)活化的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的因子(趨化因子) Anti-CCL5/RANTES 0.1ml
SAP97 英文名稱: 突觸相關(guān)蛋白97抗體 0.2ml
E.coli 英文名稱: 腸致病性大腸桿抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Histone H1(Thr146) 磷酸化組蛋白H1抗體 規(guī)格 0.1ml
ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Paxillin/FITC 熒光素標(biāo)記樁蛋白Paxillin抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1抗體 Anti-ECM1 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
FGFBP1 英文名稱: 纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-TERT(Ser1125) 磷酸化端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-human IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
SA緩沖液500mlD-(+)-二本甲酰一水物/(+)-二本甲酰基-D-單水合物,英文名或英文縮寫:(+)-Dibenzoyl-D-tartaric acid monohydrate,級(jí)別:AR,規(guī)格:1克
6485-79-6三異丙基硅烷Triisopropylsilane
D-葡糖醛酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium D-glucuronate,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:2毫克
4,4'-二聯(lián)苯 4,4'-Difluorobiphenyl,97% 398-23-2 1G 通用試劑
聚吡咯烷酮/聚N-基丁基內(nèi)酰胺/聚維酮/l-基均聚物/PVP BR,K-30,分子量3.8萬(wàn) 100克 國(guó)產(chǎn)/
Raka-Ray培養(yǎng)基25毫升2~8℃
13446-18-9六水 nitnate hexahydrate
溴化鋰1克RT
2,3-二甲氧基-5-甲... Coenzyme Q0,97% 605-94-7 1G 通用試劑
肌酸磷酸二鈉 Sodium Creatine Phosphate Dibasic Tetr... 922-32-7 1G 通用試劑
L-本丙酸10克RT
56-89-3L-胱酸;;;L-β,β′-雙硫代丙酸Cystine;L-Dicysteine;L-β,β′-Dithiodialanine;L-α-DiaMino-β-dithiolacetic acid;L-3,3′-Dithiobis(2-aMinopropanoic acid);L-β,β′-DiaMino-β,β′-dicarboxydietxyl disulfide
Alumiumchloridehexahydrate結(jié)晶錄化鋁5克AR,99.5%
對(duì)基苯 4-Amino,99% 3544-25-0 5G 通用試劑
HCTU HCTU (≥98.0%) 330645-87-9 25G 通用試劑
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;植物細(xì)胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
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