公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)、不得臨床。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)：IEF陰極緩沖液

規(guī)格：250ml

貨號(hào)：XG-RY2414

儲(chǔ)存條件：室溫,12個(gè)月

用途：蛋白質(zhì)組學(xué)電泳

注意事項(xiàng)：IEF Cathode buffer
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中，充分溶解，用兩支玻璃瓶密封保存，做 好標(biāo)簽。
2 。在校正前，準(zhǔn)備ORP標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3 。86毫伏：取50至100毫升PH7.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分?jǐn)嚢琛?/span>
4 。256毫伏：取50至100毫升PH4.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分?jǐn)嚢琛?5。 ORP標(biāo)準(zhǔn)液保存期為72hour。
標(biāo)準(zhǔn)品五大類(lèi)：
1、化學(xué)成分類(lèi)：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，純的化合物或是有代表性的基體樣品，天然的或添加(被)分析物的(如，用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲(chóng)劑的動(dòng)物脂肪)，以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類(lèi)：與目錄A相似的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，但以一種或多種生化或臨床特性值表征，如酶活性。
3、物理特性類(lèi)：以一種或多種物理特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類(lèi)：以一種或多種工程特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，如硬度、拉伸強(qiáng)度和表面特性。
5、其他特性。這些類(lèi)別又被細(xì)分為三級(jí)子類(lèi)，例如，在化學(xué)成分類(lèi)中，以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金，列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類(lèi)中；在化學(xué)成分類(lèi)別中，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)兩大類(lèi)；單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物)，或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見(jiàn)光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液；這類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準(zhǔn)。

溶液的配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。

鈣非依賴(lài)性磷脂酶A2(iPLA2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒棲植物潘隆尼亞堿湖桿Protein A (HRP Conjugate)

鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶激活因子2B(GUCA2B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 馬褂木炭疽盤(pán)孢TEAD1 (D9X2L) Rabbit mAb

顆粒酶K(GZMK)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 阿姆斯特丹曲霉ATP2A1/SERCA1 (D54G12) Rabbit mAb

花生四烯酸脂加氧酶3(ALOXE3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 蒙氏假單胞CUEDC2 Antibody

色素P450家族成員26A1(CYP26A1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 糙皮側(cè)耳FXR1 (D10A2) XP® Rabbit mAb

血紅蛋白(HB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒暗產(chǎn)色鏈霉FXR1 (D10A2) XP® Rabbit mAb

全色素C合酶(HCCS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 枯草芽孢桿PKR (D7F7) Rabbit mAb

鈣/鈣調(diào)蛋白依賴(lài)性蛋白激酶IIα(CAMK2α)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒波羅的海萊茵海默氏PhosphoPlus® Chk2 (Thr68) Antibody Duet

Bcl2關(guān)聯(lián)永生基因3(BAG3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒擬莖點(diǎn)霉Pontin/RUVBL1 Antibody

芳基硫酸酯酶B(ARSB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  大腸埃希氏桿APC2 Antibody

組氨酸豐富糖蛋白(HRG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 副嗜血桿Phospho-Chk1 (Ser317) (D12H3) XP® Rabbit mAb

硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒貪噬屬Phospho-Chk1 (Ser317) (D12H3) XP® Rabbit mAb

膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5 )酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  枯草芽孢桿CIN85 (D1A4) Rabbit mAb

HtrA絲氨酸肽酶1(HTRA1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒釀酒酵母Thap11/Ronin Antibody

白介素10受體β(IL10Rβ)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黑曲霉CDX2 (D11D10) Rabbit mAb

IEF陰極緩沖液250ml腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗原Anti-ATP5D Antibody絡(luò)石藤Luo Shiteng

基質(zhì)金屬蛋白酶-1Anti-ATP5F1D Antibody阿里紅Ali red

基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原)Anti-ATP5MC2 Antibody貓爪草Cat's claw

基質(zhì)金屬蛋白酶-3(抗原)Anti-ATP5MC3 Antibody菥蓂Pennycress

基質(zhì)金屬蛋白酶-7(抗原)Anti-ATP5MF Antibody土壟大白蟻巢Nest macrot

金屬基質(zhì)蛋白酶-14Anti-ATP5ME Antibody藏木香Tibet Inula root

GDNF家族受體α-1（抗原）Anti-ATP5MGL Antibody自然銅（醋煅）Natural?copper?（Cu Duan）

血管緊張素II抗原Anti-ATP6V0D1 Antibody八角蓮DFSosma versipellis

使用方法：
1.  常用篩選濃度
注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn)，來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；植物細(xì)胞20-200μg/mL；300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應(yīng)曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。
1）  未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3）  替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含培養(yǎng)基。
5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2）   每隔3-4天更換含有的篩選培養(yǎng)液。
3）  篩選7天后觀(guān)察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

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