產(chǎn)品名稱：一步法凝膠制備試劑盒

規(guī)格：10T

貨號：XG-RY2418

儲存條件：4℃,避光,6個月

用途：本產(chǎn)品對傳統(tǒng)SDS丙烯酰胺凝膠改良優(yōu)化，形成了相應(yīng)濃度的分離膠和4.5%的濃縮膠溶液，使用時您只需要加入過硫酸銨和TEMED即可，分離膠和濃縮膠同時灌入玻璃板，然后插入梳子，操作十分簡單。傳統(tǒng)的SDS-PAGE膠由于不能長期存放，需要現(xiàn)用現(xiàn)配，所以費時費力。本試劑盒提供的中性緩沖液系統(tǒng)，可幫助您輕松制備可長期存放的并且具有高分辨率的預制膠，所以您可以在短時間內(nèi)同時制備大量可長期存放的高質(zhì)量凝膠，以備不時之需。另外，利用本系統(tǒng)制備的預制膠，可高效兼容傳統(tǒng)的電泳/轉(zhuǎn)膜

液。（）

注意事項：切記：不需要等分離膠凝固之后再加濃縮膠；加入分離膠之后立即就加濃縮膠，也不需要加水壓線
公司產(chǎn)品僅供科研實驗、不得臨床。

產(chǎn)品屬性：

溶液的配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法：
1.  常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；植物細胞20-200μg/mL；300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1）  未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2）  根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3）  替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4）  接下來每3-4天更換新的含培養(yǎng)基。
5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，將細胞稀釋至豐度不超過25%
2）   每隔3-4天更換含有的篩選培養(yǎng)液。
3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

標準溶液配制：
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中，充分溶解，用兩支玻璃瓶密封保存，做 好標簽。
2 。在校正前，準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏：取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分攪拌。
4 。256毫伏：取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類：
1、化學成分類：標準物質(zhì)，純的化合物或是有代表性的基體樣品，天然的或添加(被)分析物的(如，用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動物脂肪)，以一種或多種化學或物理化學特性值表征。
2、生物和臨床特性類：與目錄A相似的標準物質(zhì)，但以一種或多種生化或臨床特性值表征，如酶活性。
3、物理特性類：以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì)，如熔點、粘性和密度。
4、工程特性類：以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì)，如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類別又被細分為三級子類，例如，在化學成分類中，以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金，列于化學成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類中；在化學成分類別中，標準物質(zhì)還可進一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類；單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物)，或純度、濃度、熔點、熔化焓值、粘度、紫外可見光吸光率、閃點等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液；這類標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。
載脂蛋白A5(ApoA5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  釀酒酵母Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)

載脂蛋白B100(ApoB100)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 德氏乳桿保加利亞亞種SOS1 (D3T7T) Rabbit mAb

拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子(AATF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒糞產(chǎn)堿p44/42 MAPK (Erk1/2) Blocking Peptide (#4695 Specific)

肝脂酶 (LIPC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒根瘤SignalSilence® p27 Kip1 siRNA II

凋亡誘導因子(AIF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 毛頭鬼傘Immunofluorescence Blocking Buffer

胃脂酶 (LIPF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒丁香尾孢PAX3 Antibody

凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  白僵α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)

凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 枝孢屬SignalSilence® UCHL1 siRNA II

堿性成纖維生長因子(bFGF/FGF2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒溶淀粉類芽孢桿CARD9 Antibody

抑肽酶(AP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 新城疫病CK1δ Antibody

異常凝血酶原(APT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  木材游動四孢NLRC4 (D5Y8E) Rabbit mAb

中間α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒裂褶IL-1β (D4T2D) Rabbit mAb (Mouse Specific)

水通道蛋白1(AQP-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 柱形孢鏈霉Phospho-Smad1 (Ser463/465)/ Smad5 (Ser463/465)/ Smad9 (Ser465/467) (D5B10) Rabbit mAb (PE Conjugate)

水通道蛋白2(AQP-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 傳染性****病Smad1 (D59D7) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)

水通道蛋白3(AQP-3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 土庫曼野野村氏Phospho-Src (Ser17) (D7F2Q) Rabbit mAb

一步法凝膠制備試劑盒10T艾滋病?。乖?/span>Anti-B4GALT3 Antibody山楂（山楂）Hawthorn?（Crataegus）

熱休克蛋白-60（抗原）Anti-B4GALT1 Antibody紫蘇子Zi Suzi

熱休克蛋白-70（多肽抗原）Anti-B4GALT3 Antibody大腹皮Pericarpium Arecae

銜接蛋白α抗原Anti-B4GALT5 Antibody使君子（使君子仁）Idolkimi

Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑（抗原）Anti-BACH2 Antibody桃仁（山桃）Peach?（Prunus）

胰島素降解酶（抗原）Anti-BAG1 Antibody阿米卡星Amikacin

人胰島素樣生長因子-I受體Anti-BAG4 Antibody高山紅景天Rhodiola sachalinensis

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-5(抗原)Anti-BAGE2 Antibody鹿茸（馬鹿）Pilose antler?（red deer）

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