產(chǎn)品名稱:通用顯影粉
規(guī)格:1L
貨號:XG-RY2483
儲存條件:室溫,24個月
用途:Western blot蛋白印跡膜中ECL發(fā)光后,顯影液
注意事項:含兩個包裝,小袋溶解完全后再溶大袋。可加熱至50度助溶。
公司產(chǎn)品僅供科研實驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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通用顯影粉1L
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1L
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XG-RY2483
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溶液的配制與標(biāo)定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標(biāo)簽。
2 。在校正前,準(zhǔn)備ORP標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標(biāo)準(zhǔn)液保存期為72hour。
標(biāo)準(zhǔn)品五大類:
1、化學(xué)成分類:標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類:與目錄A相似的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類:以一種或多種物理特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如熔點、粘性和密度。
4、工程特性類:以一種或多種工程特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類別又被細分為三級子類,例如,在化學(xué)成分類中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類中;在化學(xué)成分類別中,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)還可進一步被分為單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)兩大類;單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點、熔化焓值、粘度、紫外可見光吸光率、閃點等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準(zhǔn)。
松弛肽2(RLN2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 朗比可假絲酵母SignalSilence® OSR1 siRNA I
視黃結(jié)合蛋白1(RBP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒四孢菇PSMC2 (D5T1T) Rabbit mAb
生存素(Surv)酶聯(lián)吸附測定試劑盒枯草芽孢桿M-RIP (D8G8R) Rabbit mAb
視黃結(jié)合蛋白3(RBP3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒梨黑星Eg5 (E1L3W) Rabbit mAb
轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒新疆鹽地桿NRF2 (D1Z9C) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒突孢毛殼Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control (Pacific Blue? Conjugate)
血小板**素(TPO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黑曲霉變種Ras (G12V Mutant Specific) (D2H12) Rabbit mAb
血小板反應(yīng)蛋白1(TSP-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 堿線屬Nav1.5 (D9J7S) Rabbit mAb
血小板反應(yīng)蛋白2(TSP-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 赤霉Zap-70 (D1C10E) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
白介素7受體(IL7R)酶聯(lián)吸附測定試劑盒無環(huán)田頭菇c-Myc (D84C12) Rabbit mAb (Pacific Blue? Conjugate)
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL/TNFSF10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒Candidatus Rhizobium Ras (G12D Mutant Specific) (D8H7) Rabbit mAb
破骨分化因子(ODF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 大腸埃希SF3B1 (D7L5T) Rabbit mAb
磷脂酶D1(PLD1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒Ag-16(蘑菇)CART (D6M2M) Rabbit mAb
可溶性髓系觸發(fā)受體-1(sTREM-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒柿尾孢LEF1 (C12A5) Rabbit mAb (PE Conjugate)
髓系觸發(fā)受體-1(TREM-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒地衣芽孢桿p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)
通用顯影粉1L白介素-23抗原Anti-CREBBP Antibody豚鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)elisa檢測試劑盒
白介素4抗原Anti-CRP Antibody兔滑行蛋白α(TXLNa)elisa檢測試劑盒
白介素4抗原Anti-CREBBP Antibody豚鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)elisa檢測試劑盒
白介素5抗原Anti-CREBZF Antibody豚鼠磷脂爬行酶1(PLSCR1)elisa檢測試劑盒
白介素6Anti-CRP Antibody豚鼠非紅血影蛋白β4 (SPTβN4)elisa檢測試劑盒
白介素7抗原Anti-CRYAB Antibody兔外顯肽(Extein)elisa檢測試劑盒
白介素6受體α抗原Anti-CRYAB Antibody兔成纖維生長因子受體3(FGFR3)elisa檢測試劑盒
白介素-6受體抗原Anti-CSE1L Antibody兔8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)elisa檢測試劑盒
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