產(chǎn)品名稱:麗春紅S染色浸出液
規(guī)格:100ml
貨號:XG-RY2496
儲存條件:室溫,12個月
用途:檢測醋酸纖維薄膜上的蛋白質(zhì),CAM電泳(CAE),也稱作洗脫液。適用于麗春紅S染色后的洗脫。
注意事項:主要由氫氧化鈉等組成。
公司產(chǎn)品僅供科研實驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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麗春紅S染色浸出液100ml
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100ml
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XG-RY2496
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溶液的配制與標(biāo)定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;植物細(xì)胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標(biāo)簽。
2 。在校正前,準(zhǔn)備ORP標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分?jǐn)嚢琛?/span>
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分?jǐn)嚢琛?5。 ORP標(biāo)準(zhǔn)液保存期為72hour。
標(biāo)準(zhǔn)品五大類:
1、化學(xué)成分類:標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類:與目錄A相似的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類:以一種或多種物理特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類:以一種或多種工程特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如硬度、拉伸強(qiáng)度和表面特性。
5、其他特性。這些類別又被細(xì)分為三級子類,例如,在化學(xué)成分類中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類中;在化學(xué)成分類別中,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)兩大類;單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準(zhǔn)。
平滑肌肌球蛋白(SMM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 假交替單胞DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody)
平足蛋白(PDPN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒瘟病RBMX/hnRNP G (D7C2V) Rabbit mAb
破骨激因子1 (OSF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒擬青霉DTX3L (D5F2J) Rabbit mAb
破骨相關(guān)受體(OSCAR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒蘇云金芽胞桿肯尼亞亞種Bax (D3R2M) Rabbit mAb (Rodent Preferred)
球蛋白M(IgM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 四川散斑殼S6 Ribosomal Protein (5G10) Rabbit mAb (Biotinylated)
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒柱狀田頭菇HER3/ErbB3 (D22C5) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)
葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 耐冷冷桿Stat3 (D3Z2G) Rabbit mAb (Biotinylated)
葡萄糖激酶(GCK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 栗疫Doublecortin (A8L1U) Rabbit mAb
葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 梨葉殼小圓孢Integrin β4 (D8P6C) XP® Rabbit mAb
葡萄糖氧化酶(GOD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 熱帶假絲酵母Integrin β4 (D8P6C) XP® Rabbit mAb
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 節(jié)桿LSR (D3E3N) XP® Rabbit mAb
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒PseudarthrobacterLSR (D3E3N) XP® Rabbit mAb
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 微桿CIP2A (D1M3H) Rabbit mAb
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母APC10 Antibody
通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 深藍(lán)鐮孢PTMScan®Pan-Methyl Lysine Kit
麗春紅S染色浸出液100mlN-鈣粘附分子抗原Anti-DBF4 Antibody猴載脂蛋白A2(ApoA2)elisa檢測試劑盒
E-鈣粘附分子抗原Anti-DAPK3 Antibody猴甘丙肽/甘丙素(GAL)elisa檢測試劑盒
去氧腎上腺素Anti-DCLK3 Antibody猴B活化因子 (BAFF/CD257/TNFSF13B)elisa檢測試劑盒
神經(jīng)粘蛋白抗原Anti-DBI Antibody猴抗神經(jīng)元核抗體1型(ANNA1)elisa檢測試劑盒
2型神經(jīng)纖維瘤抗原Anti-DCLK2 Antibody猴血管**素受體Tie1(ANG-R-Tie1)elisa檢測試劑盒
活化T核因子1蛋白Anti-DCLRE1B Antibody兔胎盤蛋白14 (PP14)elisa檢測試劑盒
磷酸化核因子/磷酸化k基因結(jié)合核因子抗原Anti-DCLRE1C Antibody兔基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)elisa檢測試劑盒
核因子50/κ基因結(jié)合核因子50抗原Anti-DCT Antibody猴神經(jīng)膠質(zhì)成熟因子β(GMFβ)elisa檢測試劑盒
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