產(chǎn)品名稱:Britton-Robinson緩沖液
規(guī)格:500ml
貨號:XG-RY2560
儲存條件:4℃,2個月
用途:又稱伯瑞坦-羅比森緩沖液。
注意事項:主要由磷酸、乙酸、硼酸、氫氧化鈉等組成。
公司產(chǎn)品僅供科研實驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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Britton-Robinson緩沖液500ml
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500ml
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XG-RY2560
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溶液的配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類:
1、化學(xué)成分類:標準物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類:與目錄A相似的標準物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類:以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì),如熔點、粘性和密度。
4、工程特性類:以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類別又被細分為三級子類,例如,在化學(xué)成分類中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類中;在化學(xué)成分類別中,標準物質(zhì)還可進一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類;單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點、熔化焓值、粘度、紫外可見光吸光率、閃點等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。
肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒中國克魯維酵母EDC4/Ge-1 Antibody
線粒體肌酸激酶1A(CKMT1A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黃色短桿Phospho-CDK9 (Thr186) Antibody
線粒體肌酸激酶1B(CKMT1B)酶聯(lián)吸附測定試劑盒頭SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit
肌肉肌酸激酶(CKM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒金黃殼囊孢AMPKγ3 Antibody
晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)酶聯(lián)吸附測定試劑盒貝雷絲孢酵母AMPKγ3 Antibody
I型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTXΙ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒球孢白僵eEF1A Antibody
α-骨膠原交聯(lián)(α-CTx)酶聯(lián)吸附測定試劑盒總狀毛霉p27 Kip1 Antibody
I型前膠原C末端肽(CICP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒沼澤紅假單胞p27 Kip1 Antibody
隱花色素1(CRY1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒大腸埃希氏GLI1 Antibody
晶狀體球蛋白αB(CRYaB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒溶桿CD28 (CD28.2) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjugate)
I型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 串珠鐮刀GFP Antibody
Ⅲ型前膠原C端肽(PIIICP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒氧化微桿Calpain 1 Large Subunit (Mu-type) Antibody
骨退化特異標志物(CTX-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 核青霉p57 Kip2 Antibody
C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族2成員C(CLEC2C)酶聯(lián)吸附測定試劑盒類芽孢桿p57 Kip2 Antibody
C型鈉尿肽(CNP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒明尼蘇達被毛孢FastScan? Total Smad2 ELISA Kit
Britton-Robinson緩沖液500ml 3-磷酸甘油脫氫酶Anti-GPRC5C Antibody大鼠11-去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)elisa檢測試劑盒
谷氨酸脫羧酶-65(抗原)Anti-GPRC5D Antibody大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 (ACE)elisa檢測試劑盒
糖原合酶激酶-3β(多肽)Anti-GPRASP1 Antibody大鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)elisa檢測試劑盒
核突觸蛋白-γ抗原Anti-GPRC5B Antibody大鼠甘氨酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(GNMT)elisa檢測試劑盒
胰高血糖素樣肽-1受體多肽Anti-GPRC5D Antibody大鼠凝血因子Ⅷ(FⅧ)elisa檢測試劑盒
慶大霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPRIN1 Antibody大鼠微管蛋白聚合促進蛋白(TPPP)elisa檢測試劑盒
重組谷胱甘肽-轉(zhuǎn)移酶Anti-GPRC6A Antibody大鼠胰蛋白酶(TRY)elisa檢測試劑盒
慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白Anti-GPRC6A Antibody大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)elisa檢測試劑盒
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