細胞特性
產品名稱
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H9c2(2-1)(大鼠心肌細胞)
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英文名稱
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H9c
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分類
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大鼠細胞系
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貨號
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XG-X9194
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組織來源
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心臟,心肌層
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形態(tài)
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成肌細胞
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細胞別稱;H9c2 (2-1); H9c2; H9C2;大鼠心肌細胞系
種屬來源;大鼠
年齡性別;胚胎
組織來源;心臟,心肌層
生長特性;貼壁生長
細胞形態(tài);成肌細胞
細胞代數;10代以內
背景介紹;H9c2(2-1)細胞是一株由Kimes·B和Brandt·B從BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細胞株亞克隆得到的細胞株;H9c2(2-1)細胞表現出許多骨骼肌的特性。H9c2(2-1)細胞中的成肌細胞能融合形成多核的肌管,并對乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應。如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%,H9c2(2-1)細胞融合發(fā)生得很快。
生物等級;1
細胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測;無
保藏機構;ATCC; CRL-1446 BCRC; 60096
BCRJ; 0098 ECACC; 88092904
培養(yǎng)基;90%DMEM+10%FBS+P/S
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備
1) 準備1640(推薦iCell-0002)培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
細胞處理
1) 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。
公司正在出售的產品:
信號轉導與轉錄激活因子1單克隆抗體 STAT1
血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體 Angiotensin II type 1A receptor
膽堿磷酸酯酶2抗體 Phospholipase D2
蛋白酶活化受體4抗體 PAR4
FAM161A蛋白抗體 FAM161A
FBXO22蛋白抗體 FBXO22
磷酸化抑癌蛋白EZH2抗體 phospho-EZH2 (Thr487)
磷酸酯酶-2Ac抗體 PPP4C
1號染色體開放閱讀框181抗體 C1orf181
2號染色體開放閱讀框18抗體 C2orf18
肌動蛋白結合蛋白CFL抗體 Cofilin
雞馬立克氏病火雞皰疹病毒(HVT)抗體 Marek's disease turkey herpesvirus
PE標記小鼠CD38單克隆抗體 mouse CD38/PE
Rabbit
Anti-Acetyl-Histone H3 (Lys64) antibody
雙特異性磷酸酶抗體16抗體 DUSP16
碳酸酐酶6抗體 CA6
大鼠Ⅱ型膠原交聯羧基端肽(CTXⅡ)elisa檢測試劑盒
H9c2(2-1)(大鼠心肌細胞)小鼠干擾素α(IFNα)elisa檢測試劑盒
雞谷胱甘肽過氧化物酶8(GPX-8)elisa分析檢測試劑盒
土壤鋰(lithium)酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量檢測試劑盒
小鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)elisa檢測試劑盒
大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶1(UGT1)elisa檢測試劑盒
小量微藻菌基因組DNA氯化銫萃取試劑盒(高多糖/酚)
兔CD8分子(CD8)elisa檢測試劑盒
人解脲脲原體抗體(UU-Ab)elisa分析檢測試劑盒
無脊椎動物和昆蟲細胞基質金屬(MMP)總活性比色法定量檢測試劑盒
小鼠內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)elisa檢測試劑盒
大鼠孤腓肽(OFQ/N)elisa檢測試劑盒
LRIT3蛋白抗體
LRIT3
細胞質脆性X智力低下蛋白結合蛋白2抗體
CYFIP2
操作步驟:
步驟1:配制程序凍存液,放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2:離心收集對數生長期的細胞(貼壁細胞消化下來離心,懸浮細胞直接離心,轉速1200rpm或250g,時間3min)
步驟3:用配制好的凍存液重懸細胞,按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中,擰緊管蓋,做好標記
步驟4:凍存管放入凍存盒,凍存盒放入-80℃冰箱過夜(24h)
步驟5:凍存管從凍存盒取出,轉移至液氮長期保存
方法二:使用無血清非程序凍存液
無血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液,無需自己配制,無需降溫盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有細胞都適用于這種凍存液,使用前必須做凍存測試,沒問題后再批量應用。
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