細胞特性
產(chǎn)品名稱
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OLN-93(大鼠少突膠質前體細胞系)
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英文名稱
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OLN
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分類
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大鼠細胞系
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貨號
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XG-X9234
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組織來源
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腦膠質
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形態(tài)
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膠質細胞樣
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細胞別稱;OLN-93;大鼠少突膠質前體細胞系
種屬來源;大鼠
組織來源;腦膠質
生長特性;貼壁生長
細胞形態(tài);膠質細胞樣
細胞代數(shù);10代以內(nèi)
背景介紹;它是由原代大鼠腦膠質細胞培養(yǎng)中自發(fā)轉化的細胞產(chǎn)生的。
細胞規(guī)格;1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測;無
培養(yǎng)基;90% DMEM+10% FBS+雙抗
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備
1) 準備1640(推薦iCell-0002)培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
細胞處理
1) 凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
細胞磷脂酶C(Phospholipase
C)活性熒光定量檢測試劑盒
OXCT2蛋白抗體
OXCT2
甲型肝炎病毒聚蛋白VP1抗體
組蛋白轉錄調節(jié)蛋白3抗體
HIR3
小腸鈉通道蛋白5抗體
ACCN5
大鼠雌二醇(E2)elisa生化檢測試劑盒
小鼠血管**素4(ANG-4)elisa檢測試劑盒
人白介素2受體(IL2R)elisa生化檢測試劑盒
Hepatitis A virus
polyprotein VP1
轉移生長因子β受體2抗體(TGF-βRⅡ,TGFβRⅡ) Anti-TGF beta R2/TGFBR2
PEG3蛋白抗體 Anti-PEG3
組蛋白賴氨酸去甲基化酶PHF8抗體 Anti-PHF8
5-羥色胺受體5A抗體 Anti-5HT5A receptor/SR-5A
PE-CY5標記的小鼠抗人IgG H&L
OLN-93(大鼠少突膠質前體細胞系)Mouse
Anti-Human IgG H&L / PE-Cy5
F-box蛋白家族FBXO7抗體
FBXO7
人Apelin elisa生化檢測試劑盒
HumanApelinELISAkit
小鼠可溶性血栓調節(jié)蛋白(sTM)elisa生化檢測試劑盒
sTMELISAKit
大鼠GTP酶 KRas
elisa生化檢測試劑盒
Rat GTPase KRas
ELISA Kit
人谷氨酰胺轉移酶2抗體(IgA)elisa生化檢測試劑盒
HumanTransglutaminase2antibodyIgAELISAkit
蘭花Malmgen培養(yǎng)基
蛋白提取試劑盒50T
大鼠磷酸化細胞外信號調節(jié)激酶(pERK)elisa檢測試劑盒
/酵母細胞高質純化線粒體分離試劑盒
操作步驟:
步驟1:配制程序凍存液,放在室溫備用或放在4℃預冷
步驟2:離心收集對數(shù)生長期的細胞(貼壁細胞消化下來離心,懸浮細胞直接離心,轉速1200rpm或250g,時間3min)
步驟3:用配制好的凍存液重懸細胞,按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中,擰緊管蓋,做好標記
步驟4:凍存管放入凍存盒,凍存盒放入-80℃冰箱過夜(24h)
步驟5:凍存管從凍存盒取出,轉移至液氮長期保存
方法二:使用無血清非程序凍存液
無血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液,無需自己配制,無需降溫盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有細胞都適用于這種凍存液,使用前必須做凍存測試,沒問題后再批量應用。
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