細(xì)胞特性
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產(chǎn)品名稱
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大鼠神經(jīng)母細(xì)胞小鼠神經(jīng)元細(xì)胞融合細(xì)胞;ND7/23
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英文名稱
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ND7/23
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分類
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大鼠細(xì)胞系
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貨號(hào)
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XG-X10028
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組織來源
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腦
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形態(tài)
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上皮細(xì)胞樣
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細(xì)胞別稱；ND7/23；大鼠神經(jīng)母細(xì)胞小鼠神經(jīng)元細(xì)胞融合細(xì)胞；大鼠/小鼠神經(jīng)元融合細(xì)胞
種屬來源；大小鼠
組織來源；腦
生長特性；貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)
背景簡介；ND7/23細(xì)胞是小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤(N18 tg 2) 和大鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元雜交細(xì)胞株（由PEG介導(dǎo)細(xì)胞融合）
細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測；無
保藏機(jī)構(gòu)；中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)****中心
培養(yǎng)基；90%DMEM+10%FBS
培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件；無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
運(yùn)輸和保存
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
細(xì)胞接收后的處理
1）收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備
1） 準(zhǔn)備1640（推薦iCell-0002）培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
細(xì)胞處理
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人SMAD2 elisa分析檢測試劑盒
水土中亞硝酸鹽含量測試盒
載玻片細(xì)胞CASPASE-7蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
小鼠Toll樣受體5(TLR-5)elisa檢測試劑盒
細(xì)胞裂解液50ml
犬膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)elisa分析檢測試劑盒
血液乙醛脫氫酶1活性比色法定量檢測試劑盒
小鼠顆粒體蛋白(GRN)elisa檢測試劑盒
大鼠防御素5 elisa分析檢測試劑盒
溶質(zhì)載體家族蛋白26成員3抗體 SLC26A3
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2重組兔單克隆抗體 ABCG2
LIN7C蛋白抗體 LIN7C
MEX3C蛋白抗體 MEX3C
腫瘤/睪丸抗原81抗體 ARMC3 (Cancer/testis antigen 81)
周期素D3抗體 Cyclin D3
高爾基復(fù)合體CFR1抗體 Golgi Complex
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶2抗體 GSTA2
大鼠神經(jīng)母細(xì)胞小鼠神經(jīng)元細(xì)胞融合細(xì)胞;ND7/23線粒體復(fù)合物NDUFS3蛋白抗體 NDUFS3
腺苷酸環(huán)化酶5抗體 ADCY5
癌基因蛋白抑瘤素M抗體 Oncostatin M
白細(xì)胞介素12 β亞基蛋白抗體 IL-12 beta
CAP1抗體 PARK7/DJ1
CD85h抗體 LILRA2/CD85h
細(xì)胞抗原75（CD205）重組兔單克隆抗體 LY75
磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 phospho-SHC1 (Tyr239 + Tyr240)
通用型山羊Q熱（Q
Fever）基因檢測試劑盒
兔阿霉素(ADR)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
大鼠凝血因子Ⅵ(F6)elisa檢測試劑盒
賴氨酰氧化酶樣3抗體
LOXL3
親環(huán)蛋白（親環(huán)素）40抗體
Cyclophilin 40/PPID
操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預(yù)冷
步驟2：離心收集對數(shù)生長期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時(shí)間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細(xì)胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉(zhuǎn)移至液氮長期保存
方法二：使用無血清非程序凍存液
無血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無需自己配制，無需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細(xì)胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒問題后再批量應(yīng)用。
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