操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預(yù)冷
步驟2：離心收集對數(shù)生長期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細(xì)胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉(zhuǎn)移至液氮長期保存
方法二：使用無血清非程序凍存液
無血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無需自己配制，無需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細(xì)胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒問題后再批量應(yīng)用。
細(xì)胞特性
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產(chǎn)品名稱
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大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞；RBL-1
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英文名稱
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RBL-1
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分類
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大鼠細(xì)胞系
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貨號
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XG-X9798
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組織來源
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血液
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形態(tài)
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母細(xì)胞樣
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細(xì)胞別稱；RBL 1; RBL-I; RBL; Rat
Basophilic Leukemia-1
種屬來源；大鼠
組織來源；血液
生長特性；懸浮生長
細(xì)胞形態(tài)；母細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)
背景介紹；RBL-1細(xì)胞由HMetzger和Clsersky由一名白血病患者的外周血中分離并建立，細(xì)胞表現(xiàn)出啫堿性粒多種細(xì)胞特性，例如細(xì)胞表面帶有lgE受體.但在IgE介導(dǎo)的反應(yīng)中，該細(xì)胞并不釋放組織胺。
細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
培養(yǎng)基；RBL-1細(xì)胞培養(yǎng)基
保藏機(jī)構(gòu)；ATCC; CRL-1378;BCRC;
60198;CCTCC; GDC0315;CLS; 500389;DSMZ; ACC-147;ECACC; 86061001;ICLC;
ATL01001;IZSLER; BS TCL 55
培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
運(yùn)輸和保存
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
細(xì)胞接收后的處理
1）收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備
1） 準(zhǔn)備1640（推薦iCell-0002）培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
細(xì)胞處理
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
通用型雞鼠傷（ST）基因檢測試劑盒
組織AX1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
人抵抗素(Resistin)elisa分析檢測試劑盒
大鼠復(fù)制蛋白A 70kDaDNA結(jié)合亞基(RPA1)elisa檢測試劑盒
乙醛脫氫酶（ALDH）試劑盒
小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(ELA2)elisa檢測試劑盒
大鼠腦紅蛋白(NGB)elisa檢測試劑盒
大量藍(lán)藻菌基因組DNA氯化銫萃取試劑盒
兔8-異構(gòu)前列腺素(8-epi-PGF2α)elisa分析檢測試劑盒
乳糖酶根皮苷水解酶1抗體 LCT
上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體 ECT2
LYSMD4蛋白抗體 LYSMD4
MRVI1蛋白抗體 MRVI1
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子3相互作用蛋白1抗體 TRAF3IP1
軸索過度生長抑制因子B抗體 Nogo B
睪丸特異蛋白酶樣蛋白50抗體 TSP50
骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體 BMP15
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞；RBL-1線粒體核糖體蛋白S24抗體 MRPS24
小腦變性相關(guān)蛋白2抗體 CDR2
巴豆酰組蛋白H2B重組兔單克隆抗體 Histone H2B (Crotonyl-Lys15 / Lys16 / Lys20)
白血病抑制因子抗體 LIF
CD27重組兔單克隆抗體 CD27
COPT2抗體 COPT2
磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體 phospho-Kidins220 (Ser918)
磷酸化蛋白酪氨酸激酶9抗體 phospho-PTK9 (Tyr321)
小鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)elisa檢測試劑盒
大鼠S100蛋白(S-100)elisa檢測試劑盒
透射電鏡（TEM）制片處理包埋液
角蛋白相關(guān)蛋白15.1抗體
KAP15.1
趨化因子結(jié)合蛋白2抗體
CCBP2
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