【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:Ezrin (Ab-567) Antibody
規(guī)格:詳見說明
測試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設(shè)計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
L-山梨糖(標準品) L-(-)-Sorbose 87-79-6 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 ELISA完全制備試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次
糖精鈉 水合物(標準品) Saccharin sodium salt hydrate 82385-42-0 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 抗原涂板(COATING)緩沖液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
碘標準溶液(0.05000mol/L(0.1N)) Iodine solution 7553-56-2 質(zhì)量規(guī)格:0.05000mol/L(0.1N) 一抗涂板(COATING)緩沖液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
碘標準溶液(1000μg/ml,溶劑:水) Iodine solution 7553-56-2 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:水 清理緩沖液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
鈧標準溶液(1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3) Scandium standard 7440-20-2 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3 通用樣品稀釋緩沖液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
反式丁烯醛(standard for GC) (E)-2-Butenal 123-73-9 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC 抗體稀釋緩沖液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
十二烷(Standard for GC,≥99.5% (GC)) Dodecane 112-40-3 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5% (GC) 通用封阻緩沖液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
正癸酸(Standard for GC,>99%(GC)) Decanoic acid 334-48-5 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99%(GC) 非哺乳動物封阻緩沖液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
己二酸二甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC)) Dimethyl adipate 627-93-0 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC) 非蛋白封阻緩沖液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
馬來酸二丁酯(standard for GC,≥99.5%(GC)) Dibutyl maleate 105-76-0 質(zhì)???規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC) AP底物pNPP緩沖溶液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
二甲基亞砜(Standard for GC,≥99.95%(GC)) Dimethyl sulfoxide 67-68-5 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.95%(GC) HRP底物OPD緩沖溶液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC)) n-Decyl alcohol 112-30-1 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC) HRP底物TMB緩沖溶液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
琥珀酸二乙酯(standard for GC,≥99.6%(GC)) Diethyl succinate 123-25-1 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.6%(GC) HRP反應終止緩沖液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
癸二酸二乙酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) Diethyl sebacate 110-40-7 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, ≥99.5% (GC) AP反應終止緩沖液 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100毫升
Ezrin (Ab-567) Antibody大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒 英文名: IKBα ELISA Kit
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒 英文名: VEGF-C ELISA Kit
小鼠膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒 英文名: GDNF ELISA Kit
大鼠細胞周期素D3(CCND3)ELISA試劑盒 英文名: CCND3 ELISA Kit
小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 英文名: β-EPR ELISA Kit
大鼠絲裂原激活的蛋白激酶1/MAP激酶1(MAPK1)ELISA試劑盒 英文名: MAPK1 ELISA Kit
大鼠VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)ELISA試劑盒 英文名: VCC1 ELISA Kit
小鼠凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)ELISA試劑盒 英文名: F13B ELISA Kit
大鼠γ干擾素受體(IFN-γR)ELISA試劑盒 英文名: IFN-γR ELISA Kit
小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒 英文名: sCD40L ELISA Kit
小鼠8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒 英文名: 8-OHdG ELISA Kit
大鼠間羥素(MN)ELISA試劑盒 英文名: MN ELISA Kit
小鼠腫瘤壞死因子α誘導蛋白6(TNFαIP6)ELISA試劑盒 英文名: TNFαIP6 ELISA Kit
大鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒 英文名: Collagenase I ELISA Kit
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。
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