操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內,顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細胞內的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調零,讀取各管吸光度值。一般應數(shù)小時內檢測完畢。
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱:eIF4E (Ab-209) Antibody
規(guī)格:詳見說明
測試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點:
1、優(yōu)化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)銪(III)(>95%(T)) Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)europium(III) 15522-71-1 質量規(guī)格:>95%(T) 血液L-乳酸比色法定量檢測試劑盒 進口/國?? 規(guī)格:20次
三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)鐠(Ⅲ)(>97.0%(T)) Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionato)praseodymium(III) 17978-77-7 質量規(guī)格:>97.0%(T) 體液L-乳酸比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
(S)-(+)-1,1'-聯(lián)萘基-2,2'-雙磷酸氫酯(>97.0%(T)) (S)-(+)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl Hydrogen Phosphate 35193-64-7 質量規(guī)格:>97.0%(T) 細胞總乳酸比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
(R,R)-(-)-2,3-丁二醇(>96.0%(GC)) (R,R)-(-)-2,3-Butanediol 24347-58-8 質量規(guī)格:>96.0%(GC) 組織總乳酸比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
(S,S)-(+)-2,3-丁二醇(>97.0%(GC)) (S,S)-(+)-2,3-Butanediol 19132-06-0 質量規(guī)格:>97.0%(GC) 血液總乳酸比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
(-)-樟腦烷酸(>98.0%(T)) (-)-Camphanic Acid 13429-83-9 質量規(guī)格:>98.0%(T) 體液總乳酸比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
(R)-(-)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙醇(>99.0%(GC)) (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol 53531-34-3 質量規(guī)格:>99.0%(GC) 人體血液正鐵白蛋白(methemalbumin)含量比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
(S)-(+)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙醇(>99.0%(GC)) (S)-(+)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol 60646-30-2 質量規(guī)格:>99.0%(GC) 人體體液正鐵白蛋白(methemalbumin)含量比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
N-(2-羧基苯甲酰)-(-)-10,2-樟腦磺內酰胺(>98.0%(HPLC)(T)) N-(2-Carboxybenzoyl)-(-)-10,2-camphorsultam 179950-32-4 質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 動物血液正鐵白蛋白(methemalbumin)含量比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
對茴香酸(>99.0%(GC)(T)) p-Anisic Acid 100-09-4 質量規(guī)格:>99.0%(GC)(T) 組織硫化氫含量比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
9-蒽羧酸(>97.0%(GC)(T)) 9-Anthracenecarboxylic Acid 723-62-6 質量規(guī)格:>97.0%(GC)(T) 血液硫化氫硫化氫含量比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
5-(4-甲氧羰基苯基)-10,15,2-三苯基卟吩(>90.0%(HPLC)) 5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin 119730-06-2 質量規(guī)格:>90.0%(HPLC) 細胞酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
2-萘甲酰氯(>98.0%(GC)(T)) 2-Naphthoyl Chloride 2243-83-6 質量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 組織酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
4-二甲基氨基肉桂醛(>98.0%(T)) 4-Dimethylaminocinnamaldehyde 6203-18-5 質量規(guī)格:>98.0%(T) 血液酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
eIF4E (Ab-209) Antibody小鼠髓鞘堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 英文名: MBP ELISA Kit
大鼠纖維蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 英文名: Fbg ELISA Kit
大鼠酸脫氫酶磷酸酶(PDP)ELISA試劑盒 英文名: PDP ELISA Kit
小鼠腎損傷分子1(Kim1)ELISA試劑盒 英文名: Kim1 ELISA Kit
大鼠成纖維細胞生長因子13(FGF-13)ELISA試劑盒 英文名: FGF-13 ELISA Kit
小鼠葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)ELISA試劑盒 英文名: G6PD ELISA Kit
小鼠Osterix蛋白(OSX)ELISA試劑盒 英文名: OSX ELISA Kit
大鼠凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒 英文名: GS ELISA Kit
小鼠二肽基肽酶4(DPP4/CD26)ELISA試劑盒 英文名: DPP4/CD26 ELISA Kit
大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒 英文名: pIKBα ELISA Kit
豚鼠內皮型一化氮合酶(NOS3)ELISA試劑盒 英文名: NOS3 ELISA Kit
小鼠核糖核酸酶A3(RNASE3)ELISA試劑盒 英文名: RNASE3 ELISA Kit
大鼠L選擇素(SELL)ELISA試劑盒 英文名: SELL ELISA Kit
小鼠鈣調素(CAM)ELISA試劑盒 英文名: CAM ELISA Kit
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