操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品:
a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。
4、分光光度計(jì)檢測405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測完畢。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:PRL-3 Antibody
規(guī)格:詳見說明
測試方法:詳見說明
客戶自備儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
檸檬酸鐵(>98%,BR) Iron(III) citrate 3522-50-7 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 冰凍切片組織CYP1A2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
DL-乳酸(85~90%,BR) DL-Lactic acid 50-21-5 質(zhì)量規(guī)格:85~90%,BR 石蠟切片組織CYP1A2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
DL-乳酸(USP) DL-Lactic acid 50-21-5 質(zhì)量規(guī)格:88~92%,USP 載玻片細(xì)胞CYP1A2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
檸檬酸三銨 Ammonium citrate, tribasic 3458-72-8 質(zhì)量規(guī)格:> 98%,AR 冰凍切片組織CYP1A2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
鉻天青S(Ind Grade) CAS, Chrome azurol S 1667-99-8 質(zhì)量規(guī)格:Ind Grade 石蠟切片組織CYP1A2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
5'-三磷酸胞苷二鈉鹽 Cytidine-5'-triphosphate (CTP), disodium salt 652154-13-7 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級 細(xì)胞CYP1A2蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/50 次
纖維素酶(酶活>45 U/mg) Cellulase 9012-54-8 質(zhì)量規(guī)格:酶活>45 U/mg,BC 細(xì)胞CYP1A2蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/50 次
派洛寧Y(Ind Grade) Pyronin Y 92-32-0 質(zhì)量規(guī)格:Ind Grade CYP1A2蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
魚精蛋白硫酸鹽來源于鮭魚 Protamine sulfate from Salmom 53597-25-4 質(zhì)量規(guī)格:Grade II,sigma分裝 CYP1A2蛋白共沉淀分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸鹽鈉鹽(分子生物學(xué)級) BCIP, disodium salt 102185-33-1 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級 CYP1A2蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:25次
乙酸銅水合物(>99%,BR) Copper(II) acetate, hydrate 6046-93-1 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 細(xì)胞CYP2B1蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
磷酸肌酸鈉鹽四水 Creatine phosphate 922-32-7 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 載玻片細(xì)胞CYP2B1蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
1,6-二磷酸果糖三鈉鹽(98-101.0%,BR) Fructose 1,6-bisphosphate, 3sodium salt 81028-91-3 質(zhì)量規(guī)格:98-101.0%,BR 冰凍切片組織CYP2B1蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
1,6-二磷酸果糖三鈉鹽(98-101.0%,BR) Fructose 1,6-bisphosphate,3sodium salt 81028-91-3 質(zhì)量規(guī)格:98-101.0%,BR 石蠟切片組織CYP2B1蛋白表達(dá)PRL-3 Antibody小鼠磷酸烯醇式酸羧激酶1(PCK1)ELISA試劑盒 英文名: PCK1 ELISA Kit
大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 英文名: NAG ELISA Kit
小鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒 英文名: CT ELISA Kit
大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體4(TRAIL-R4)ELISA試劑盒 英文名: TRAIL-R4 ELISA Kit
大鼠核因子κB抑制因子α(IκBα)ELISA試劑盒 英文名: IκBα ELISA Kit
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒 英文名: IGFBP2 ELISA Kit
大鼠黃體**素(LH)ELISA試劑盒 英文名: LH ELISA Kit
小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒 英文名: HO-2 ELISA Kit
小鼠蛋白Z(PROZ)ELISA試劑盒 英文名: PROZ ELISA Kit
大鼠球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒 英文名: IgA ELISA Kit
小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒 英文名: Orexin A ELISA Kit
大鼠羧甲基賴氨酸(CML)ELISA試劑盒 英文名: CML ELISA Kit
大鼠3-羥基3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMGCR)ELISA試劑盒 英文名: HMGCR ELISA Kit
小鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 英文名: INH-A ELISA Kit
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