ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要**價(jià)廉、**、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
產(chǎn)品名稱:大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Free Testoterone
檢測(cè)范圍:0.375ng/mL~12ng/mL
靈敏度:0.1
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-R70177
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)品保存:2-8℃,有效期6個(gè)月
主要組成成分:試劑
性狀:液體
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本,2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本,1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照
96T-84個(gè)樣本
48T-42個(gè)樣本
待檢樣本:體液,血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,尿液,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。
本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)**的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
組成結(jié)構(gòu):
1、 血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)**的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測(cè)
試劑盒成分:
1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T
2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
3 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說(shuō)明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒(méi)有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)
1-羥基布洛芬(布洛芬雜質(zhì)))(非對(duì)映異構(gòu)體混合物) 1-Hydroxy Ibuprofen (Ibuprofen Impurity L)(Mixture of Diastereomers) 53949-53-4 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
1-含氧的布洛芬 1-Oxo Ibuprofen 65813-55-0 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
羧酸布洛芬(非對(duì)映異構(gòu)體混合物) Ibuprofen Carboxylic Acid(Mixture of Diastereomers) 15935-54-3 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
外消旋α-羥基布洛芬 rac α-Hydroxy Ibuprofen 60057-62-7 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
(R)-布洛芬 (R)-Ibuprofen 51146-57-7 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
(S)-布洛芬 (S)-Ibuprofen 51146-56-6 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
依那普利 Enalapril 75847-73-3 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
1,3-二芐基-5-氟尿嘧啶 1,3-Dibenzyl-5-fluorouracil 75500-02-6 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
1,3-二(芐氧基甲基)-5-氟尿嘧啶 1,3-Di(benzyloxymethyl)-5-fluorouracil 75500-03-7 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
5-氟乳清酸水合物 5-Fluoroorotic acid hydrate 207291-81-4 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
5-氟-1,3-二甲基尿嘧啶 5-Fluoro-1,3-dimethyluracil 3013-92-1 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
5-氟尿嘧啶核苷 5-Fluorouridine 316-46-1 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
5-氟二氫嘧啶-2,4-二酮 5-Fluorodihydropyrimidine-2,4-dione 696-06-0 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
舒馬曲坦-d6 Sumatriptan-d6 1020764-38-8 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒大鼠 DAD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1185) 磷酸化胰島素受體β抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 PRL8A9 基因全長(zhǎng)ORF克隆Insulin 胰島素蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 TAF9 基因全長(zhǎng)ORF克隆Integrin alpha 3/CD49c 整合素α3抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 RTN1 基因全長(zhǎng)ORF克隆Integrin Alpha 3 + Beta 1 整合素α3β1抗體(Integrin α3β1)規(guī)格: 0.2ml
大鼠 APOC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆Integrin beta 5 整合素β5抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 CRYAB 基因全長(zhǎng)ORF克隆Integrin alpha 1/CD49a 整合素α1抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 SPC25 基因全長(zhǎng)ORF克隆Integrin beta 7 整合素β7抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 NDUFA3 基因全長(zhǎng)ORF克隆Integrin Alpha V + Beta1 整合素αVβ1抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 UBB 基因全長(zhǎng)ORF克隆Integrin Alpha V + Beta 3 (CD51+CD61) 整合素αVβ3抗體規(guī)格: 0.2ml
大鼠 ALDOA 基因全長(zhǎng)ORF克隆Integrin Alpha V + Beta 5 整合素αVβ5抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 RAMP3 基因全長(zhǎng)ORF克隆Integrin Alpha V + Beta 6 整合素αVβ6抗體規(guī)格: 0.2ml
大鼠 ENO3 基因全長(zhǎng)ORF克隆Integrin alpha E/CD103 整合素αE抗體規(guī)格: 0.1ml
大鼠 RPL36A 基因全長(zhǎng)ORF克隆IQGAP1 支架蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
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