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產(chǎn)品資料

豬瘟病毒(CSFV)熒光-PCR法

豬瘟病毒(CSFV)熒光-PCR法
  • 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱:豬瘟病毒(CSFV)熒光-PCR法
  • 產(chǎn)品型號:BJ-01R4871
  • 產(chǎn)品展商:邦景
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
豬瘟病毒(CSFV)熒光-PCR法不需要分離病毒培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
產(chǎn)品描述

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

訂購信息:

產(chǎn)品名稱:豬瘟病毒(CSFV)熒光-PCR法

英文名稱:詳見說明
貨號:BJ-01R4871

產(chǎn)品規(guī)格:48T/盒

運輸:低溫

保存:負20度

有效期:一年

貨期:現(xiàn)貨

【儲存條件及有效期】:

-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。

【適用儀器】:

ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。

【樣本采集、存放及運輸】:

u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;

u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);

u 運輸:采用**或泡沫箱加冰密封進行運輸。

本公司產(chǎn)品僅用于科研。

【自備試劑】:

核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

1、 酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。


使用方法:

一、樣品 RNA 的制備

1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout

2、或柱式病毒 RNAout。

二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)

2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。

3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),

反應(yīng)終體積為 20μL。

4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。

5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。

實驗注意事項:

1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;

2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;

3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括量和相對定量)和定性分析。

主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

UQCRQ Human  25g  XL335  25mg    

Y.Enterocolitica (O:9) YopM  5g  3-hydroxy Anthranilic Acid  100mg    

Hydrocortisone buteprate  2μg  Fibrinopeptide B, human TFA  1mg    

Chloroac-Trp-OH  5mg  9(R)-PAHSA  5μg    

Sulfaguanidine  1mg  WZ4141R  250mg    

Hydrocortisone cypionate  5mg  Piloty’s Acid  10mg    

Cirazoline hydrochloride  1mg  Pemetrexed  5mg    

ArnicolideC  100mg  Asoprisnil  50mg    

MS 245 oxalate  10mM*1mLinDMSO  Biotinyl-Atrial Natriuretic Factor (1-28) (human)  1g    

Hispidalin  20mg  ITI214  50mg    

CD200 Human, Sf9  1mg  FGF basic (119-126) (human, mouse, rabbit, rat)  1mg    

Quetiapine sulfoxide  10μg  (2S,3S)-E1R  10mg    

C8 Ceramine (d18:1/8:0)  2μg  (+)-DHMEQ ((1R,2R,6R)-Dehydroxymethylepoxyquinomicin)  50mg    

5-Nonyloxytryptamine oxalate  1mg  Pioglitazone (potassium salt)  2μg    

Albendazole sulfoxide D3  500mg  H-Dap-OH.HBr  10mg    

豬瘟病毒(CSFV)熒光-PCR法S-Lorlatinib  Lorlatinib (PF-06463922) 是一種具有口服活性,選擇性,腦滲透性和 ATP 競爭性的 ROS1/ALK 抑制劑。Lorlatinib 對于

Fimasartan  Fimasartan(BR-A-657)是血管緊張素受體AT1非肽類拮抗劑,用于**高血壓和心力衰竭。

Fimasartan Potassium Trihydrate;BR-A 657  Fimasartan(BR-A-657)是血管緊張素受體AT1非肽類拮抗劑,用于**高血壓和心力衰竭。

Efonidipine  Efonidipine(NZ-105)是T型和L型鈣離子通道雙重阻斷劑。

Efonidipine Hydrochloride  Efonidipine Hydrochloride是T型和L型鈣離子通道雙重阻斷劑。

Efonidipine Hydrochloride ethanol (1:1:1)  Efonidipine hydrochloride monoethanolate (NZ-105 hydrochloride monoethanolate) 是

Vonoprazan Fumarate  Vonoprazan Fumarate (TAK-438) 是有一種口服活性的 鉀競爭性酸阻斷劑,抑制 H+, K+-ATPase的 IC50 值為 19 nM

Vonoprazan;TAK438  Vonoprazan (TAK-438 free base) 是有一種口服活性的 鉀競爭性酸阻斷劑,抑制 H+, K+-ATPase的 IC50 值為 19 n

R-Avanafil  Avanafil(TA-1790)是高活性PDE-5抑制劑,IC50為5.2 nM,對PDE1,PDE6和PDE11活性較低。

Ozanimod hydrochloride  Ozanimod (RPC-1063) 是一種有效的選擇性 S1P1 和 S1P5 受體激動劑,在[35S]-GTPγS 結(jié)合實驗中,EC50 分別為 410

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