操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱
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測(cè)定方法
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規(guī)格
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貨號(hào)
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硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)生化試劑盒(微量法)
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微量法
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100管/96樣
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BJ-0161172-100管/96樣
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商品介紹:
測(cè)定意義:TPX屬于過氧化物酶家族,在體內(nèi)主要通過還原過氧化氫和一些氫過氧化物來實(shí)現(xiàn)抗氧化作用,功能與GPX類似,也是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。TPX普遍存在于各種生物體內(nèi),如酵母、植物、動(dòng)物、原生動(dòng)物、寄生蟲、**和古**,在進(jìn)化上高度保守。TPX與細(xì)胞增殖、分化、細(xì)胞凋亡及腫瘤發(fā)生調(diào)控密切相關(guān)。TPX的主要功能包括細(xì)胞脫毒、抗氧化和調(diào)節(jié)由過氧化氫介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和**反應(yīng)。測(cè)定原理:TPX催化H2O2氧化二硫蘇糖醇(DTT),H2O2的吸收波長(zhǎng)為240nm,通過測(cè)定240nm吸光度的下降速率,通過對(duì)照減去過氧化氫酶(CAT)催化分解的H2O2,即可計(jì)算出TPX活性。因此,本試劑盒可以同時(shí)測(cè)定樣品TPX和CAT活性。需自備的儀器和用品:低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水 。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
封閉蛋白PBS緩沖系統(tǒng)封閉液(干粉) 1包
MEK162 絲裂原活化蛋白激酶抑制劑(MEK162) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
Caspase 2 Activity Assay Kit Caspase 2 活性檢測(cè)試劑盒 20次|100次
Antifade Polyvinylpyrrolidone Mounting Medium 抗熒光淬滅PVP封片液 5ml
Salinomycin sodium salt Salinomycin sodium salt 1mL(10mM)|50mg|100mg
HA14-1 HA14-1 1mL(10mM)|10mg|50mg
Protein A/G Immunoprecipitation Kit Protein A/G**沉淀磁珠試劑盒 20次/100次
AZD2858 GSK-3抑制劑(AZD2858) 1mL(10mM)|10mg|50mg
Valdecoxib COX-2抑制劑(Valdecoxib) 1mL(10mM)|10mg|50mg
Hoechst33342/PI細(xì)胞凋亡染色試劑盒 100T
Campathecin DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑(Campathecin) 1mL(10mM)|100mg|500mg
多酚氧化酶(PPO)測(cè)試盒(微量法) 100管/48樣
Bosutinib Src/Abl抑制劑(Bosutinib) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
NSC 23766 trihydrochloride Rac GTPase抑制劑 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)生化試劑盒(微量法)犬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 Poly-L-Lysine Solutiona(5mg/ml)規(guī)格:1ml
人高密度脂蛋白(HDL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅)規(guī)格:100ml
人前列腺素F(PGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 鏈霉素-青霉素(100X)規(guī)格:100ml
山羊膽囊收縮素8(CCK-8)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 Hanks’ Balanced Salt Solution規(guī)格:500ml
小鼠抗IVIgG抗體ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Hanks’ Balanced Salt Solution (with Ca2+& Mg2+)規(guī)格:500ml
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 蘇木素伊紅(HE)染色試劑盒規(guī)格:>200次
大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 尼氏(Nissl)染色液規(guī)格:100ml
人2,3-磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 結(jié)晶紫染色液規(guī)格:100ml
人黑色素瘤相關(guān)抗原(MAGE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 中性紅染色液規(guī)格:100ml
兔細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 馬松(Masson)三色法染色試劑盒規(guī)格:500ml
人殺傷細(xì)胞**球蛋白樣受體(KIR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 中性紅染色液(活細(xì)胞染色用)規(guī)格:100ml
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