操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱
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測定方法
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規(guī)格
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貨號
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丙酮酸脫氫酶(PDH)生化試劑盒(微量法)
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微量法
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100管/96樣
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BJ-01611143-100管/96樣
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商品介紹:
測定意義
PDH(EC 4.1.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是丙酮酸脫氫酶復(fù)合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶,催化丙酮酸脫梭**羥乙基-TPP,把糖酵解和三羧酸循環(huán)連接起來。
測定原理PDH催化丙酮酸脫氫,同時(shí)還原WST-8產(chǎn)生黃色物質(zhì),從而導(dǎo)致450nm光吸收的增加。可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
TDZD-8 GSK-3β抑制劑(TDZD-8) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
F 11440 5HT1A受體激動劑(F 11440) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg
Epibrassinolide 癌細(xì)胞潛在凋亡誘導(dǎo)劑(Epibrassinolide) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|500mg
Fadrozole aromatase抑制劑(Fadrozole) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
Na+k+——ATP酶測試盒(微量法) 100管/48樣
RITA RITA 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
PBS磷酸鹽緩沖液(20×) 500ml
IC87201 PSD95-nNOS相互作用抑制劑(IC87201) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
SH-4-54 STAT3抑制劑(SH-4-54) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
SKI II 鞘氨醇激酶(SK)抑制劑(SKI II) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg
Immunol Fluorence Staining Kit with Cy3-Labeled Goat Anti-Mouse IgG Cy3抗小鼠**熒光染色試劑盒 >300次
AZD8330 MEK1/2抑制劑(AZD8330) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Corynoxine 柯諾辛堿(Corynoxine) 1mL(10mM)|5mg|10mg
CX-4945 CK2抑制劑(CX-4945) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
丙酮酸脫氫酶(PDH)生化試劑盒(微量法)小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 原位胰腺腺癌細(xì)胞英文名稱:BxPC-3
小鼠總膽固醇(TC)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 **上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
牛磷酸果糖激酶(PFK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 整合 SV40基因的上皮細(xì)胞英文名稱:HBL-100
人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 正常胎肝細(xì)胞英文名稱:L-O2
人娠特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 支氣管成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 支氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
小鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 支氣管上皮細(xì)胞英文名稱:16HBE
大鼠白介素15(IL-15)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 支氣管上皮細(xì)胞英文名稱:BEAS-2B
人本周蛋白(BJP) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
鵝催素(PRL)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 支氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
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