操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

生化法檢測試劑盒：分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法，自主**，技術(shù)**團(tuán)隊，操作簡便快捷，規(guī)格合理、系列成套，價格合理，是廣大科研工作者的好選擇。

商品介紹：

測定意義：

CA是線粒體三羧酸循環(huán)的**個中間產(chǎn)物，由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成，其含量是三羧酸循環(huán)強度的主要指標(biāo)之一。

配合測定丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量，其中（1）丙酮酸含量和丙酮酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進(jìn)行程度，（2）綜合分析丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況，（3）乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環(huán)進(jìn)行狀況。

測定原理：

CA在檸檬酸裂解酶的作用下，**α-酮酸（草酰乙酸）；在弱酸性條件下，α-酮酸進(jìn)一步與苯肼反應(yīng)，**相應(yīng)的α-酮酸苯腙；α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰，該波長下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。

自備儀器和用品：

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。

儀器：

1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

特點:

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡便、快速

微波輻射抗原修復(fù)試劑盒  2×100ml

堿性磷酸酶測試盒(AKP)  48T

NFAT Inhibitor  NFAT抑制劑(NFAT Inhibitor)  1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg

中性甲醛鈣固定液(10%)  500ml

GSK269962A  ROCK抑制劑(GSK269962A)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

KIRA6  IRE1α RNase激酶抑制劑(KIRA6)  1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg

PCI-34051  HDAC8抑制劑(PCI-34051)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

PCI-32765  Btk抑制劑(PCI-32765)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

Nifuroxazide  STAT抑制劑（Nifuroxazide）  1mL(10mM)|200mg|500mg

標(biāo)準(zhǔn)革蘭氏染色液  4×10ml|4×100ml|4×250ml|4×500ml

Cebranopadol ((1α,4α)stereoisomer)  ORL-1激活劑  1mL(10mM)|2mg|5mg

western轉(zhuǎn)移緩沖液(尼龍膜)  500ml

MHP  SPHK1激活劑(MHP)  1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|20mg

1-Deoxynojirimycin  α葡萄糖苷酶抑制劑（1-Deoxynojirimycin）  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg

線粒體檸檬酸(MCA）含量生化試劑盒（微量法）小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  小鼠白血病克隆細(xì)胞系英文名稱：L6565

小鼠胰島素(INS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  小鼠白血病細(xì)胞英文名稱：P388

大鼠核因子κB抑制蛋白α（IKB-α）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  小鼠白血病細(xì)胞英文名稱：M1

雞催素(PRL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  小鼠白血病細(xì)胞英文名稱：L1210

人不對稱甲基氨酸(ADMA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  小鼠白血病細(xì)胞英文名稱：M1

人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  小鼠白血病細(xì)胞英文名稱：L1210

人血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  小鼠白血病細(xì)胞英文名稱：P388

小鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性英文名稱：NFS-60

植物草酸氧化酶(OxO)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性英文名稱：NFS-60

犬促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  小鼠表皮角化細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

大鼠可溶性瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  小鼠表皮黑色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

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