操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

生化法檢測試劑盒：分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法，自主**，技術(shù)**團隊，操作簡便快捷，規(guī)格合理、系列成套，價格合理，是廣大科研工作者的好選擇。

商品介紹：

 測定意義：

糖原磷酸化酶（Glycogen phosphorylase，GP，EC 2.4.1.1)）是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶，使糖原分子從非還原端逐個斷開α-1，4-糖苷鍵移去葡萄糖基，釋放1-磷酸葡萄糖，直至臨近糖原分子α-1，6-糖苷鍵分支點前4個葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a（GPa）和無活性的糖原磷酸化酶b（GPb）兩種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸（5，-AMP）存在下可被激活。

測定原理：

GP催化糖原和無機磷產(chǎn)生葡萄糖殘基**糖原和1-磷酸葡萄糖，磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步依次催化NADP還原**NADPH，在340nm下測定NADPH上升速率，即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸（5，-AMP）時測定GP（GPa和GPb）活性，未添加腺苷酸（5，-AMP）時測定GPa活性，GP活性－GPa活性得到GPb活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

儀器：

1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

特點:

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡便、快速

纖維化蛋白(FBS)ELISA試劑盒  Fibrosin(FBS)ELISA Kit

纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)ELISA試劑盒  Fibrinogen Like Protein 1(FGL1)ELISA Kit

纖維蛋白原γ(FGγ)ELISA試劑盒  Fibrinogen Gamma(FGg)ELISA Kit

纖維蛋白原β(FGβ)ELISA試劑盒  Fibrinogen Beta(FGb)ELISA Kit

纖維蛋白原α(FGα)ELISA試劑盒  Fibrinogen Alpha(FGa)ELISA Kit

纖維蛋白原(FG)ELISA試劑盒  Fibrinogen(FG)ELISA Kit

纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒  Fibrinopeptide B(FPB)ELISA Kit

纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒  Fibrinopeptide A(FPA)ELISA Kit

纖維蛋白(FBL)ELISA試劑盒  Fibrillarin(FBL)ELISA Kit

纖溶抑制因子(TAFI)ELISA試劑盒  Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor(TAFI)ELISA Kit

糖原磷酸化酶b（GPb）生化試劑盒50管/24樣PDK1抑制劑(GSK2334470)GSK23344701mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

DUBs抑制劑(VLX1570)VLX15701mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

NADPH氧化酶抑制劑(Apocynin)Apocynin1mL(10mM)|1g|5g

泛PIM抑制劑PIM-447 dihydrochloride1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

泛WNK-kinase抑制劑(WNK463)WNK4631mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

LDHA抑制劑(GNE-140 racemate)GNE-140 racemate1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

VCP/p97抑制劑(NMS-873)NMS-8731mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

HDAC6抑制劑(ACY-1215)ACY-12151mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

PI3K抑制劑(GSK2126458)GSK21264581mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

Met-related抑制劑(BMS 777607)BMS 7776071mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

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