一抗操作步驟：
一抗的操作步驟主要包括封閉、?一抗孵育和洗滌。?
封閉：?這一步驟的目的是為了防止非特異性的蛋白質(zhì)結(jié)合位點與抗體結(jié)合，?從而引起非特異的染色和背景。?通常使用惰性蛋白質(zhì)或非離子去污劑來封閉膜上的未結(jié)合位點，?以降低抗體的非特異性結(jié)合。?常用的封閉試劑有5%的BSA或脫脂奶粉，?緩沖液一般選擇PBST或TBST。?封閉條件通常為室溫或37℃緩慢搖動1～2小時，?特殊情況也可4℃過夜。?封閉完成后需要進行洗膜，?以去除膜上未結(jié)合的封閉試劑。?
一抗孵育：?在一抗孵育之前，?需要參考一抗的說明書，?按照適當(dāng)比例用封閉液稀釋一抗。?吸盡封閉液后，?立即加入稀釋好的一抗，?室溫或4℃在搖床上緩慢搖動孵育1～2小時。?如果一抗孵育一小時效果不佳，?可以在4℃緩慢搖動孵育過夜。?然后回收一抗，?加入Western洗滌液，?在搖床上緩慢搖動洗滌5-10分鐘，?共洗滌3次。?如果結(jié)果背景較高，?可以適當(dāng)延長洗滌時間并增加洗滌次數(shù)。?
洗滌：?洗滌的目的是為了洗去一抗的非特異性結(jié)合，?洗滌的效果直接影響結(jié)果背景的深淺。?建議使用PBST或TBST作為洗滌液，?其中的Tween20有助于去除非特異性的結(jié)合，?減少背景。?洗滌的次數(shù)和時間根據(jù)具體實驗來確定，?建議清洗3-5次，?每次5分鐘。
鋅指蛋白144抗體
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貨號
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規(guī)格
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價格
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用途
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BJ010979
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50ul
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1380
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僅供科研實驗
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BJ010979
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100ul
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2380
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僅供科研實驗
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BJ010979
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200ul
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3480
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僅供科研實驗
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商品屬性：
英文名稱：ZNF144
中文名稱：鋅指蛋白144抗體
別 名；DNA binding protein Mel 18; DNA-binding protein Mel-18; Mel 18; MEL-18; MGC10545; PCGF 2; PCGF2; PCGF2_HUMAN; Polycomb group ring finger 2; Polycomb group RING finger protein 2; Ring finger protein 110; RNF 110; RNF110; Zinc finger protein 144; ZNF 144; ZNF144.
研究領(lǐng)域； 細(xì)胞生物 干細(xì)胞 細(xì)胞周期蛋白 表觀遺傳學(xué)
抗體來源；Rabbit
克隆類型；Polyclonal
交叉反應(yīng)；Human, Rat, (predicted: Mouse, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, )
產(chǎn)品應(yīng)用；WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:50-200 （石蠟切片需做抗原修復(fù)）
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理論分子量；38/60kDa
細(xì)胞定位；細(xì)胞核
性 狀；Liquid
濃 度；1mg/ml
免 疫 原；KLH conjugated synthetic peptide derived from human Mel18/ZNF144: 145-245/344
亞 型；IgG
純化方法；affinity purified by Protein A
保存條件；Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項；This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
產(chǎn)品介紹：
Transcriptional repressor. Binds specifically to the DNA sequence 5'-GACTNGACT-3'. Has tumor suppressor activity. May play a role in control of cell proliferation and/or neural cell development. Regulates proliferation of early T progenitor cells by maintaining expression of HES1. Also plays a role in antero-posterior specification of the axial skeleton and negative regulation of the self-renewal activity of hematopoietic stem cells. Component of a Polycomb group (PcG) multiprotein PRC1-like complex, a complex class required to maintain the transcriptionally repressive state of many genes, including Hox genes, throughout development. PcG PRC1 complex acts via chromatin remodeling and modification of histones; it mediates monoubiquitination of histone H2A 'Lys-119', rendering chromatin heritably changed in its expressibility. Is not functionally redundant with Bmi1; unlike Bmi1 does not stimulate the E3 ubiquitin-protein ligase activity in a reconstituted PRC1-like complex.
抗體注意事項：
確定抗體的名字和特性：?注意抗體的中英文名字、?它名、?亞型等信息，?這些信息對于選擇正確的抗體至關(guān)重要。?
明確實驗類型：?了解你的實驗類型（?如ELISA、?WB、?IHC、?ICC或FACS）?，?因為抗體的說明書通常會列出該抗體經(jīng)驗證過的實驗類型。?如果說明書沒有提及某種應(yīng)用類型，?并不意味著該抗體不適用于該實驗，?只是表示尚未經(jīng)過該實驗驗證。?
選擇適當(dāng)?shù)膶嶒灅颖痉N屬：?確定你的實驗樣本是來自人類、?小鼠還是大鼠等，?因為抗體的說明書會列出該抗體經(jīng)試驗驗證過的物種。?
考慮樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)：?了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇的抗體，?特別是當(dāng)樣本蛋白在提取和處理過程中可能會變性時，?這會影響抗體的親和反應(yīng)。?
單多克隆抗體的選擇：?單克隆抗體特異性強但親和力相對小，?而多克隆抗體特異性稍弱但親和力強。?根據(jù)實驗需求選擇合適的抗體。?
注意抗體的特異性：?原的類型對抗體對靶蛋白的特異性有顯著影響。?應(yīng)選擇針對已充分表征的原產(chǎn)生的抗體，?避免使用不合適或質(zhì)量差的原產(chǎn)生的抗體。?
封閉液的選擇：?封閉液的選擇應(yīng)根據(jù)抗體說明書進行，?常用的封閉液包括脫脂奶粉和BSA。?封閉液的目的是封閉非特異性結(jié)合位點，?降低背景噪音3。?
抗體孵育注意事項：?使用干凈的孵育盒子，?避免油脂等雜物沾到膜上造成非特異信號。?如果一次性需要檢測多個蛋白，?可以考慮將膜剪開或采用其他技術(shù)如抗體洗脫液處理后再次使用膜
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