一抗操作步驟:
一抗的操作步驟主要包括封閉、?一抗孵育和洗滌。?
封閉:?這一步驟的目的是為了防止非特異性的蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)與抗體結(jié)合,?從而引起非特異的染色和背景。?通常使用惰性蛋白質(zhì)或非離子去污劑來封閉膜上的未結(jié)合位點(diǎn),?以降低抗體的非特異性結(jié)合。?常用的封閉試劑有5%的BSA或脫脂奶粉,?緩沖液一般選擇PBST或TBST。?封閉條件通常為室溫或37℃緩慢搖動(dòng)1~2小時(shí),?特殊情況也可4℃過夜。?封閉完成后需要進(jìn)行洗膜,?以去除膜上未結(jié)合的封閉試劑。?
一抗孵育:?在一抗孵育之前,?需要參考一抗的說明書,?按照適當(dāng)比例用封閉液稀釋一抗。?吸盡封閉液后,?立即加入稀釋好的一抗,?室溫或4℃在搖床上緩慢搖動(dòng)孵育1~2小時(shí)。?如果一抗孵育一小時(shí)效果不佳,?可以在4℃緩慢搖動(dòng)孵育過夜。?然后回收一抗,?加入Western洗滌液,?在搖床上緩慢搖動(dòng)洗滌5-10分鐘,?共洗滌3次。?如果結(jié)果背景較高,?可以適當(dāng)延長洗滌時(shí)間并增加洗滌次數(shù)。?
洗滌:?洗滌的目的是為了洗去一抗的非特異性結(jié)合,?洗滌的效果直接影響結(jié)果背景的深淺。?建議使用PBST或TBST作為洗滌液,?其中的Tween20有助于去除非特異性的結(jié)合,?減少背景。?洗滌的次數(shù)和時(shí)間根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來確定,?建議清洗3-5次,?每次5分鐘。
血管緊張素Ⅱ抗體
貨號(hào)
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規(guī)格
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價(jià)格
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用途
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BJ004328
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50ul
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1380
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僅供科研實(shí)驗(yàn)
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BJ004328
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100ul
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2380
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僅供科研實(shí)驗(yàn)
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BJ004328
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200ul
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3480
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僅供科研實(shí)驗(yàn)
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商品屬性:
英文名稱:Angiotensin II
中文名稱:血管緊張素Ⅱ抗體
別 名;Alpha 1 antiproteinase, antitrypsin; Ang II;
ANG III; Angiotensin I; Angiotensin II; Angiotensin III; Angiotensinogen;
Angiotensinogen (serpin peptidase inhibitor, clade A member 8); ANHU; Pre
angiotensinogen; Serine (or cysteine) proteinase inhibitor; Serpin A8;
SERPINA8; AT-2; AT-II; ANGT_HUMAN.
研究領(lǐng)域;心血管
抗體來源;Rabbit
克隆類型;Polyclonal
交叉反應(yīng);Human, Rat, (predicted: Mouse, Dog, Horse, Sheep, )
產(chǎn)品應(yīng)用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復(fù))
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理論分子量;53kDa
細(xì)胞定位;分泌型蛋白
性 狀;Liquid
濃 度;1mg/ml
免 疫 原;(DRVYIHPF-GG)8K4K2KG
亞 型;IgG
純化方法;affinity purified by Protein A
保存條件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng);This product as supplied is
intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic
applications.
產(chǎn)品介紹:
Essential component
of the renin-angiotensin system (RAS), a potent regulator of blood pressure,
body fluid and electrolyte homeostasis. In response to lowered blood pressure,
the enzyme renin cleaves angiotensinogen to produce angiotensin-1 (angiotensin
1-10). Angiotensin-1 is a substrate of ACE (angiotensin converting enzyme) that
removes a dipeptide to yield the physiologically active peptide angiotensin-2
(angiotensin 1-8). Angiotensin-1 and angiotensin-2 can be further processed to
generate angiotensin-3 (angiotensin 2-8), angiotensin-4 (angiotensin 3-8).
Angiotensin 1-7 is cleaved from angiotensin-2 by ACE2 or from angiotensin-1 by
MME (neprilysin). Angiotensin 1-9 is cleaved from angiotensin-1 by ACE2.
抗體注意事項(xiàng):
確定抗體的名字和特性:?注意抗體的中英文名字、?它名、?亞型等信息,?這些信息對于選擇正確的抗體至關(guān)重要。?
明確實(shí)驗(yàn)類型:?了解你的實(shí)驗(yàn)類型(?如ELISA、?WB、?IHC、?ICC或FACS)?,?因?yàn)榭贵w的說明書通常會(huì)列出該抗體經(jīng)驗(yàn)證過的實(shí)驗(yàn)類型。?如果說明書沒有提及某種應(yīng)用類型,?并不意味著該抗體不適用于該實(shí)驗(yàn),?只是表示尚未經(jīng)過該實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。?
選擇適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)樣本種屬:?確定你的實(shí)驗(yàn)樣本是來自人類、?小鼠還是大鼠等,?因?yàn)榭贵w的說明書會(huì)列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過的物種。?
考慮樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì):?了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇的抗體,?特別是當(dāng)樣本蛋白在提取和處理過程中可能會(huì)變性時(shí),?這會(huì)影響抗體的親和反應(yīng)。?
單多克隆抗體的選擇:?單克隆抗體特異性強(qiáng)但親和力相對小,?而多克隆抗體特異性稍弱但親和力強(qiáng)。?根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的抗體。?
注意抗體的特異性:?原的類型對抗體對靶蛋白的特異性有顯著影響。?應(yīng)選擇針對已充分表征的原產(chǎn)生的抗體,?避免使用不合適或質(zhì)量差的原產(chǎn)生的抗體。?
封閉液的選擇:?封閉液的選擇應(yīng)根據(jù)抗體說明書進(jìn)行,?常用的封閉液包括脫脂奶粉和BSA。?封閉液的目的是封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn),?降低背景噪音3。?
抗體孵育注意事項(xiàng):?使用干凈的孵育盒子,?避免油脂等雜物沾到膜上造成非特異信號(hào)。?如果一次性需要檢測多個(gè)蛋白,?可以考慮將膜剪開或采用其他技術(shù)如抗體洗脫液處理后再次使用膜
公司正在銷售的產(chǎn)品:
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調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體
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Dkc1; DKC1_HUMAN; DKCX; Dyskeratosis congenita 1; Dyskeratosis congenita 1
dyskerin; Dyskerin; H/ACA ribonucleoprotein complex subunit 4; NAP 57; NAP57;
NAP-57; NOLA 4; NOLA4; Nopp140 associated protein of 57 kDa;
Nopp140-associated protein of 57 kDa; Nucleolar protein family A member 4;
Nucleolar protein NAP57; snoRNP protein DKC1; XAP 101; XAP101.
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