原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：
以胚胎小鼠為例 1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數(shù)秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開(kāi)腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無(wú)菌平皿內(nèi)。 2．用Hanks液洗滌3次，剪開(kāi)取出胚胎。血液和筋膜等組織。 3．用彎頭剪把胚胎盡量剪碎，每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行，即消化法和組織塊培養(yǎng)法。 4．若使用消化法，則將組織塊放人三角燒瓶?jī)?nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無(wú)菌紗布過(guò)濾。取過(guò)濾液，800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清，加入帶有雙抗的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。 注：細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同，所采用的消化酶也不相同（如膠原酶，透明質(zhì)酶等）。 5．若進(jìn)行組織塊培養(yǎng)，則不做步驟4，加入幾滴血清于組織塊中，再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開(kāi)，注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2－3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基，使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基，放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
牛骨骼肌細(xì)胞
組織來(lái)源
肌肉組織
貨號(hào)
P-X2303
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
生長(zhǎng)特性
貼壁
產(chǎn)品類別
牛原代細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)
長(zhǎng)梭狀細(xì)胞
細(xì)胞詳述：
產(chǎn)品規(guī)格： >5 × 10 5 細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格： T-25 培養(yǎng)瓶
細(xì)胞 詳述 ：
骨骼肌細(xì)胞（ Skeletal muscle cells ）是人和動(dòng)物體內(nèi)大的細(xì)胞之一，它們是由成肌細(xì)胞 (Myoblasts) 融合而來(lái)的多核細(xì)胞，故骨骼肌的形成是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程，并需要多種細(xì)胞信號(hào)通路的參與，包括 phosphatidylinositol 3-kinase ， calcineurin ， STAT3 和 MAPK 等。原代骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng)是研究細(xì)胞分化過(guò)程的有效的模型。
細(xì)胞特性：
1）1） 1mL 凍存細(xì)胞懸液裝于 1.8ml 的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在 -80 ℃的條件下保存 1 個(gè)月。
2) T-25 培養(yǎng)瓶充滿完全
我們推薦使用 原代 骨骼肌 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)原代骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品 使用：
1) 本產(chǎn)品僅能用于科研
2) 本產(chǎn)品 未通過(guò)直接用于活體動(dòng)物和人的審核
3) 本產(chǎn)品未通過(guò)用于活體診斷的審核
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注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。