雞真皮成纖維細胞
組織來源
皮膚組織
貨號
P-X2309
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
生長特性
貼壁
產(chǎn)品類別
雞原代細胞
細胞形態(tài)
長梭形細胞 不規(guī)則細胞
細胞詳述：
成纖維細胞屬于由中胚層分化而來的間質(zhì)細胞。由于這些細胞非常容易培養(yǎng)，它們已經(jīng)被廣泛用于細胞和分子生物學研究中。一般而言，成纖維細胞能夠分泌I型和III型膠原等細胞外基質(zhì)，并且研究表明不同器官中的成纖維細胞有顯著的不同。傷口修復(fù)時，真皮成纖維細胞由可增殖，可遷移的表型變?yōu)橛惺湛s性的，可重塑基質(zhì)的表型，同時，它們會分泌大量的透明質(zhì)酸來應(yīng)對修復(fù)時的炎癥反應(yīng)。
1）組織來源于實驗動物的正常皮膚組織。
2)細胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式：長梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
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原代細胞實驗步驟：
以胚胎小鼠為例 1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數(shù)秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內(nèi)。 2．用Hanks液洗滌3次，剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。 3．用彎頭剪把胚胎盡量剪碎，每個組織塊小于1mm3。在操作時應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進行，即消化法和組織塊培養(yǎng)法。 4．若使用消化法，則將組織塊放人三角燒瓶內(nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液，800r/min離心5~10min收集細胞。棄上清，加入帶有雙抗的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。 注：細胞分離的方法各實驗室不同，所采用的消化酶也不相同（如膠原酶，透明質(zhì)酶等）。 5．若進行組織塊培養(yǎng)，則不做步驟4，加入幾滴血清于組織塊中，再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個鋪展開，注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2－3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過來，從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基，使細胞接觸到培養(yǎng)基，放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進行培養(yǎng)。
注意事項：
1.收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
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