介紹一個可以確認RNA溶液中有沒有殘留的RNA酶的方法。
保溫試驗:
方法很簡單的,按照樣品濃度,從RNA溶液中吸取兩份1000 ng的RNA加入至0.5 ml的離心管中,并且用pH7.0的Tris緩沖液補充到10 ul的總體積,然后密閉管蓋。把其中一份放入70℃的恒溫水浴中,保溫1 h。另一份放置在-20℃冰箱中保存1 h。
時間到了之后,取出兩份樣本進行電泳。電泳完成后,比較兩者的電泳條帶。如果兩者的條帶一致或者無明顯差別(當然,它們的條帶也要符合方法2中的條件),則說明RNA溶液中沒有殘留的RNA酶污染,RNA的質量很好。相反的,如果70℃保溫的樣本有明顯的降解,則說明RNA溶液中有RNA酶污染。
如果你的RNA樣本通過了保溫實驗的檢測并且你在后續(xù)的實驗中還是非常小心的防范RNA酶的騷擾,那么你的實驗應該是很難失敗了!