實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.產(chǎn)品名稱本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃**,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號(hào)
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大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞
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詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
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BJ-99310
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服務(wù)描述:
公司提供委托細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù),細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:
客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司科技提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、公司科技售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:
客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研。
運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
反油酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Elaidic acid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC) 牛環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒 Bovine cyclic
adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
十七碳酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Heptadecanoic
acid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 牛黃體**素(LH)試劑盒 Bovine leinizing
hormone,LH ELISA kit
十七碳酸(98%) Heptadecanoic
acid 質(zhì)量規(guī)格:0.98 牛活化素A(ACV-A)試劑盒 Bovine Activin
A,ACV-A ELISA Kit
隱色孔雀石綠(標(biāo)準(zhǔn)品) Leucomalachite
Green 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 牛肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)試劑盒 Bovine Creatine
Kinase BB Isoenzymes,CK-BB ELISA Kit
二十酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl
Arachidate 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%(GC) 牛肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒 Bovine Creatine
Kinase MB Isoenzyme,CK-MB ELISA Kit
蓖麻油酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl
ricinoleate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%(GC) 牛甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)試劑盒 Bovine
Thyroxine-Binding Globulin,TBG ELISA Kit
山崳酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl
behenate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 牛甲狀腺素(T4)試劑盒 Bovine
thyroxine,T4 ELISA Kit
二十四烷酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl
tetracosanoate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 牛檢測(cè)(acetone)ELISA檢測(cè)試劑盒BovineacetoneELISAKit
96T/48T
芥酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl
cis-13-docosenoate 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC) 牛堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子2(FGF2)試劑盒 Bovine
Heparin-binding growth factor 2,FGF2 ELISA kit
十九酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Nonadecanoic
Acid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5% (GC) 牛降鈣素(CALCA/CALC)試劑盒 Bovine
Calcitonin,CALCA/CALC ELISA kit
小鼠冠狀動(dòng)脈組織提取物【Coronary Artery:Normal
MouseCoronary Artery Derivatives】 規(guī)格50rxn/ 10μg/ 200μg
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Mouse Coronary Artery:NormalCoronary Artery Derivatives】 規(guī)格50rxn/ 5μg/ 200μg
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞保存 規(guī)格5×105
117857-93-9
L-CCG-l 10mg Listeria monocytogenes單核細(xì)胞增生李斯特菌探針?lè)晒舛?span>PCR
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa
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