實驗要點及說明:
1.產(chǎn)品名稱本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需???更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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NCI-H1299細胞
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詳見說明書
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BJ-99501
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服務描述:
公司提供委托細胞培養(yǎng)服務,細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:
客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司科技提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司科技售后服務標準。
保存和應用:
客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研。
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
GST融合蛋白谷胱甘肽樹脂再生試劑盒20 蛋白酶VIII Protease type VIII 質(zhì)量規(guī)格:美國原裝進口7-15 units/mg,來源于地衣芽孢桿菌
MouseThyroidStimulatingHormone,TSHELISA試劑盒小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 曲安奈德 Triamcinolone Acetonide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP-5b ELISA Kit 曲安奈德(標準品) Triamcinolone Acetonide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA檢測試劑盒RatneuropeptideY,NP-YELISAKit
96T/48T β-NADH;還原性輔酶I二鈉鹽 β-NADH.hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>90%,羅氏分包
人膽(CH)試劑盒 Human cholesterol,CH ELISA Kit 蘇拉明鈉 Suramin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RatProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit大鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 彈性蛋白酶 Elastase, pancreatic from porcine
pancreas 質(zhì)量規(guī)格:30 units/mg
GST融合蛋白因子10α(FACTORXa)酶切試劑盒10 脂肪酶 Lipase 質(zhì)量規(guī)格:20000U/g,BR
Mousetoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISA試劑盒小鼠毒性休克綜合征1(TSST-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 木聚糖酶 Xylanase from Trichoderma viride 質(zhì)量規(guī)格:BR,6萬U/G
小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP5b)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP5b ELISA Kit 透明質(zhì)酸,玻尿酸(分子量80萬-150萬) Hyaluronic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:80萬-150萬
大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA檢測試劑盒RatAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit 96T/48T 透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量3K) Hyaluronic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:3000
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PSI-352938 (PSI-938) 5mg Plum Pox Virus(PPV)李痘病毒RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
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Fmoc-Orn(Boc)-OPfp 1g Phytophthora spec.疫霉菌PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
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Fmoc-Orn(Boc)-OPfp 25g Phytophthora ramorum櫟樹猝死病菌PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
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Fmoc-Orn(Boc)-OPfp 5g Phytophthora spec.疫霉菌PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
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