菌種的培養(yǎng)：產(chǎn)品僅用于科研

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純**菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的**菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在**上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些**菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 放線菌孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為種子，把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。

微生物培養(yǎng)方法：

1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。

2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。

上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù)，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜，對平板的要求比較高，可參照以下步驟：

a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。

b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。

c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展，使之分布均勻。

RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKiatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit大鼠凝血因子IX(FIX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 甲氨蝶呤（標準品）  Methotrexate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品

751型分光光度儀1毫升1厘米光徑玻璃比色皿1個 尼美舒利  Nimesulide  質(zhì)量規(guī)格：>99%

MouseGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISA試劑盒小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 硝酸咪康唑  Miconazole Nitrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%

小鼠天冬酰胺內(nèi)肽酶(LGMN)ELISA試劑盒 ，英文名： LGMN ELISA Kit 硝酸咪康唑(標準品)  Miconazole Nitrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,標準品

豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測試劑盒GuineaPigplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 96T/48T 硫酸小諾霉素/硫酸小諾米星/硫酸沙加霉素  Micronomicin Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：含量≥590 μg/mg

牛皮質(zhì)醇(Coisol)試劑盒 Bovine Coisol ELISA Kit 小諾霉素（標準品）  Micronomicin Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：效價測定

英文名稱HumanMMP-1——Maixmetalloproteinase-1ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)規(guī)格：96T/48T MUG;4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸  4-MUG  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

動物全組織糖蛋白高酸希爾(PAS)法阿爾新藍(ALCIANBLUE)染色試劑盒10 米諾地爾  Minoxidil  質(zhì)量規(guī)格：>98%

RatProstaticAcidPhosphatase,PAPELISA試劑盒大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 米諾地爾(標準品)  Minoxidil  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品

小鼠天冬酰胺合成酶(ASNS)ELISA試劑盒 ，英文名： ASNS ELISA Kit 米諾地爾（硫酸鹽）敏樂啶  Minoxidil Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%

Pfu DNA聚合酶

Pfu DNA Polymerase

產(chǎn)品規(guī)格：BR，5u/ul，99%

包裝：500U

級別：BR

度：≥99.0%

濃度：5u/ul

活性定義：在74℃、30分鐘內(nèi)，使10nmol的dNTPS滲入酸不溶性沉淀所需的酶量

產(chǎn)品組成：Pfu DNA Polymerase；10×PCR Buffer

10×PCR Buffer：200mM Tris-HCL(PH8.8), 100mM KC1, 160mM (NH4)2SO4，20mM MgSO4, 1% Triton X-100, 1mg/ml BSA

儲存緩沖液：100mM Tris-HCL(PH8.3), 0.1mM EDTA, 0.1% Tween 20, 0.1% NP-40, 50%甘油

性狀：液體。Pfu DNA Polymerase是從高溫嗜熱菌Pyrococcus furiosis中分離出來的高保真高溫DNA聚合酶。Pfu DNA Polymerase具有5′-3′外切酶的活性，能糾正PCR過程中產(chǎn)生的錯誤。是目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的所有DNA高溫聚合酶中在PCR過程中的出錯率低的一種，出錯率比普通的Taq DNA Polymerase低10倍左右。Pfu DNA Polymerase的延伸速度為每分鐘800個堿基左右，適延伸溫度為65-75℃，PCR產(chǎn)物為平末端，3′端不帶有單個的dA

5×轉(zhuǎn)錄緩沖液：200mM Tris-HCL(PH9.0,25℃), 30mM MgCL2, 50mM DTT, 50mM NaC1和10mM 亞精胺

抑制劑：金屬螯合劑，當(dāng)NaC1或KC1濃度高于150mM(SP6和T7 RNA聚合酶）時，酶活性降低超過50%，硫酸銨可使酶活性降低超過50%

失活：加入EDTA或者70℃加熱10分鐘

質(zhì)量控制：相關(guān)測試表明無內(nèi)切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染

功能測試：體外轉(zhuǎn)錄反??

特點：合成摻入特殊核苷酸，如氨基-、生物素-、熒光素-、地高辛-標記的核苷酸

性狀：液體,SP6核糖核酸聚合酶是一種依賴DNA的聚合酶，對SP6啟動子序列表現(xiàn)高度專一性。用該酶合成RNA，僅能以SP6 DNA或克隆在SP6 啟動下游的DNA作為合成模板。該酶能以32P，35S及3H標記的核苷三磷酸為底物

用途：生化研究

1-基-3-肖基-1-亞肖基胍(+4℃) 1-Mqthyl-3-nitno-1-nitnosogucnidinq 1970/2/7  HumanCathepsinK,cath-KELISAKit 人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

公司專業(yè)代理ATCC菌種，腸侵襲性大腸埃希氏菌質(zhì)量保證，為大中型科研提供嚴格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標準菌株。

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