產(chǎn)品名稱:龍膽探針法PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Radix gentianae
規(guī)格:
50次
貨號:BJ-01P3242
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:常溫
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。公司產(chǎn)品僅用于科研
組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1瓶
3 酶標(biāo)包被板 12孔×8條
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶
5 顯色劑A液 6ml×1瓶
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶
7 終止液 6ml×1瓶
8 標(biāo)準(zhǔn)品 0.5ml×1瓶
9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶
10 封板膜 2張
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照隨貨說明書中圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5龍膽探針法PCR鑒定試劑盒.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
TES. Na;2-[(三(羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸鈉 TES 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 大鼠卵泡抑素(FS)ELISA檢測試劑盒RatFollistatin,FSELISAKit
96T/48T
TES;Tris乙磺酸,2-[(三(羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸 TES 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)試劑盒 Human Compleme 3
split product,C3SP ELISA Kit
3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸鈉 TAPSO mono 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RatansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TAPSO;3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸 TAPSO 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR MAPK蛋白共沉淀分析試劑盒5
N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉 TAPS Salt 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Porcinediamineoxidase,DAOELISA試劑盒豬氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,1-環(huán)丙基乙二羧酸
1,1-Cyclopropanedicarboxylic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)ELISA試劑盒 ,英文名: ALOX5 ELISA Kit
TAPS;N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸 TAPS 質(zhì)量規(guī)格:>99%,細(xì)胞培養(yǎng)級 人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA檢測試劑盒HumanOrexinB,OX-BELISAKit
96T/48T
PI3K 抑制劑 LY294002 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,進(jìn)分 大鼠維生素C(VC)試劑盒 Rat Vitamin C,VC
ELISA Kit
羥乙基磺酸鈉 SHES 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 英文名稱RatMotilinELISAKit大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羥乙基醋酸鉀 PHES 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 赫特法病毒DNA化試劑盒10/20
小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N4-Benzoylcytidine 中文名:N4-苯甲酰胞苷 分子式:C16H17N3O6
小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISAKit
ELISA. 96T/48T N4-Benzoyl-2'-deoxycytidine 中文名:N4-苯甲?;?span lang="EN-US">-2'-