注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允?/span>DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）
取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。
SK-MEL-1(人皮膚色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 V79(中國倉鼠肺細胞)L-天門冬氨酸鉀質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL-Aspartate Potassium

CL-0036BRL-3A(大鼠正常肝細胞)5×106cells/瓶×2輔酶Q10,泛醌質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCoenzyme Q10,Ubiquinone

DCBLD1 Others Human 人 Discoidin / DCBLD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 輔酶Q10(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Coenzyme Q10

多聚賴氨酸 1 mg/mlPLL維生素A醋酸酯（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標準品vitamin A acetate

Ovary細胞，人卵巢癌細胞 兔成骨C細胞,IF細胞 胎盤滋養(yǎng)層細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)依澤替米貝β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進口Ezetimibe β-D-Glucuronide
人臍動脈平滑肌細胞總RNAHUASMC NA低碳硫鐵助溶劑shēng huà shì jì容量：RT，避光5克

MFAP5 Others Human 人 MFAP5 / MAGP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,2,4-三基務(wù)烷;異忻烷 2,2,4-TriMqthylpqntcnq 240-84-1

人腹膜內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLshēng huà shì jì容量：RT25克

PA317細胞，逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝的NIH3T3細胞 A10(大鼠主動脈血管平滑肌細胞) 小鼠骨髓瘤細胞;Sp2/0-Ag14苞肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：100毫升

CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽)1041-01-63,5-二-L-甲腺酸(-20°C)3,5-Diiodo-L-thyronine
柯薩奇病毒熒光PCR檢測試劑盒SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-7Streptozotocin鏈脲菌佐素超級1G18883-66-4

NCF2 Others Human 人 NCF-2 / NCF2 / P67phox 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 生物速 Biotin 28-82-2

小氣道上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)L-SERINEL-絲酸美國藥典級500G56-45-1RT

獼猴皮膚細胞;MMS4 人軟組織纖維瘤細胞，TE 115.T細胞 Eca-109(食管癌細胞)L-甘-甘-異白三肽100克RT，避光

人小細胞肺癌細胞;NCI-H209Peptonepeef 500g 國產(chǎn)

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