注??事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允?/span>DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）  1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法：
注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
GBA3 Others Human 人 GBA3 / CBGL1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 茶多酚;綠茶提取物質(zhì)量規(guī)格：多酚含量≥98Tea polyphenol

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A四氫姜黃素 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BRTetrahydrocurcumin

SW579細(xì)胞，人甲狀腺癌細(xì)胞 人鼻咽癌細(xì)胞系,HNE2-LMP1細(xì)胞 CL-0363Hs68(人男性正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2管花苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98,標(biāo)準(zhǔn)品Tubuloside A

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA2’-乙?；锘ㄌ擒?/span>(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品2'-Acetylacteoside

LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸氟桂利嗪質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRFlunarizine
VERO細(xì)胞衍生株;SVPAGAROSEI/TAEBLEND2.0%瓊脂糖 - TAE 混合物 2.0%生物技術(shù)級(jí)100GRT

OS-RC-2細(xì)胞，腎癌細(xì)胞 小細(xì)胞肺癌,SH-77細(xì)胞 人腎癌Wilms細(xì)胞;G401典化鉍鉀;典化鉍合四典化鉀 BisMuth potcssiuM iodidq 41944-01-8

KM小鼠子瘤株;U145'-ATP，Na25-三嶙酸腺苷二鈉鹽100UBR，98%

ICOSLG Others Mouse 小鼠 B7-H2 / CD275 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2-甲基吲哚，英文名或英文縮寫：2-metxylindole，級(jí)別：BR，48-50℃，規(guī)格：100克

人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38Pectin 25g/100g/500g/1kg原裝 Sigma P9135
豬痢疾密螺旋體熒光PCR檢測(cè)試劑盒SPHK1 Others Human 人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) GOLD-N-GELRNADYE,200X12.5mlRT

人表皮色素細(xì)胞-胎兒HEM-f溴代三(二甲基基)... Bromotris(dimethylamino)phosphonium He... 50296-37-2 1G 通用試劑

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2 人癌細(xì)胞，MCF-7細(xì)胞 SPC-A-1(肺腺癌細(xì)胞)L-賴安醋 L-Lysinq 26-87-1

人卵巢畸胎瘤細(xì)胞;PA-1胰胨大豆瓊脂斜面shēng huà shì jì容量：500毫升

ICAM2 Others Human 人 CD102 / ICAM2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-芴甲氧羰酰基-β-NA

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