核酸蛋白檢測儀使用說明和工作原理
一．簡介
核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀是液相色譜儀的一種紫外檢測裝置，HD–21C–A、HD–21C–B型核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀是根據(jù)生命科學的發(fā)展對于現(xiàn)代色譜儀器的要求而改進設計的一種新型紫外檢測儀。該儀器在**方面的主要特點為：
1．該儀器除了配有10mV記錄儀輸出信號外，還同時配有適合于計算機積分儀的輸出接口﹙HD–21C–B型﹚，這樣很方便于構(gòu)成色譜工作站系統(tǒng)﹙可同時進行計算機和記錄儀信號輸出，亦可省去記錄儀﹚
2．儀器的數(shù)字顯示設計為固定光吸收A顯示和可變量程光吸收A顯示兩種可選模式，這樣可方便于規(guī)范化讀數(shù)﹙特別是可應用于藥品生產(chǎn)的GMP工藝規(guī)范化管理﹚，同時亦可根據(jù)科研需要進行可變量程的高靈敏度讀數(shù)，這樣可方便于對低濃度樣品檢測﹙HD–21C–B型﹚。
3．儀器采用新型進口R212光電倍增管和改進型電路結(jié)構(gòu)﹙HD–97–1光電倍增管為1P28型﹚，儀器全部采用數(shù)字顯示2個OD值表，用戶可直接讀出光密度A值，從而使儀器靈敏度高、峰值重復性好、漂移低、性能穩(wěn)定、質(zhì)量可靠、使用方便等優(yōu)點。
該儀器配上層析柱、恒流泵、自動部分收集器、記錄儀（色譜工作站）等，即組成一套完整的液相色譜分離層析儀（系統(tǒng)）。它可應用于現(xiàn)代生物學研究、**測定、農(nóng)業(yè)科研、化工、食品及醫(yī)療科研單位對具有紫外吸收的生物樣品作定性、定量分析。它具有微量樣品池進行連續(xù)檢測，*后達到分離生物大分子。
二．主要技術性能
⑴．核酸蛋白檢測儀波長范圍：254nm、280nm﹙214nm﹚
⑵．量程靈敏度范圍：0-100℅T、0-2A、0-1A、0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A、0-0.02A、0-0.01A.
⑶．記錄儀輸出：10mV ⑷．積分儀輸出：0.1A/mV
⑸．流式樣品池：容積100微升、光程5毫米
（微量樣品池：容積80微升、光程3毫米）
⑹．數(shù)顯模式：固定A量程讀數(shù)（0-2.0A）：可變A量程讀數(shù)（0-2.0A、0-1.0A、0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A、0-0.02A、HD-21C-B型）
⑺．量程在0.05A檔時：噪音≦0.002A ⑻．工作環(huán)境溫度：-5～35℃。
⑼．基線噪音：2×10-4；LED數(shù)字顯示；儀器可連續(xù)工作1個月
⑽．儀器工作時不受到任何震動，周圍不受磁場干擾。
⑾．電源：220VAC±10%50HZ ⑿．主機重量：5kg
三、儀器結(jié)構(gòu)
核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀是單光路結(jié)構(gòu)，由紫外檢測器、電源和記錄儀三部分組成，由紫外檢測器和電源連結(jié)，屬單體結(jié)構(gòu)，現(xiàn)將其構(gòu)造分別說明如下：
⑴、 紫外檢測儀：
它由一組光源，四塊干涉濾色片，一塊聚光透鏡，一只樣品池，一只光電倍增管，一塊放大板和一塊
對數(shù)板等組成。面板上有聚乙烯塑料管的進樣口和出樣口，A調(diào)零以及調(diào)節(jié)“光量”大小旋鈕（光量大下以箭頭表示）。還有光源指示燈、電源指示燈以及量程轉(zhuǎn)換旋鈕。
光源主要提供214nm、220nm、254nm、280nm、340nm分別作為檢測核酸、蛋白、酶、多肽等的光源。
濾色器由214nm、220nm、254nm、280nm、340nm，四塊干涉濾色片組成。從光源發(fā)出的光束除214nm、220nm、254nm、280nm、340nm譜線外尚含有其他波長的譜線，通過各自所對應的濾色片就把非主譜線波長以外的其他波長濾去，這就保證了儀器的單色性。
核酸蛋白檢測儀除測214nm、254nm、280nm外，其他性能均同紫外檢測儀。
樣品池由石英玻璃管拉制而成，內(nèi)徑一般為3毫米左右，容積不大于100微升。
光電倍增管采用IP28或R212（進口）光電倍增管作為電轉(zhuǎn)換器，具有靈敏度高，穩(wěn)定性好的優(yōu)點。緊靠在光電倍增管后的放大器是一高輸入阻抗噪音的直流放大器，它把光電倍增管輸出的光電流進一步放大，然后輸入到對數(shù)轉(zhuǎn)換器。
⑵、 電源
本儀器的電源部分是一個獨立系統(tǒng)，單獨安裝在一機箱內(nèi)。機箱內(nèi)有兩塊電路板，一塊是輸出±12V和+27V的低壓穩(wěn)壓電源板，另一塊是帶有高壓負反饋的高壓穩(wěn)壓電源板，它由一組輸出-700V高壓，作為光電倍增管和光源的供電電源，光源工作電壓為160V左右，電源面板上裝有電源開關、電源指示燈。在電源后面板上，裝有電源插頭座、保險絲座、記錄儀信號插頭座以及穩(wěn)壓電源插座。
從光源發(fā)出的光經(jīng)聚光透鏡，狹縫，濾色器聚焦到樣品池上，此單色光通過樣品池射到光電倍增管的光陰極面上，使光束由于樣品濃度不同所引起透光強度的變化轉(zhuǎn)換成光電流變化，此光電流經(jīng)放大器放大，并輸入到對數(shù)轉(zhuǎn)換器、使透光率T轉(zhuǎn)換成光吸收A輸出即A=lg—=ε·CL式中ε為待測樣品的摩爾消光系統(tǒng)，C為樣品濃度，采用摩爾/升單位，L為光程，用厘米作單位。根據(jù)上式只要測出了A、L和ε就可求出樣品濃度C。若從放大器直接輸入到記錄儀，則在記錄儀上繪出的是樣品透光率T變化的圖譜，若從對數(shù)轉(zhuǎn)換器輸入到記錄儀上、在記錄儀上繪出的是樣品光吸收變化的圖譜。
四、使用說明和操作步驟
⑴、在儀器使用前，首先連接好所需配套儀器：層析柱、恒流泵、自動部分收集器、記錄儀（色譜工作站）。將各類插頭與插座接妥（220V電源）。
⑵、按下檢測儀ON電源開關，電源指示燈亮，說明整臺儀器電源開始工作，然后觀察光源指示燈，如果亮了，表示光源已開始工作，整臺儀器可進入工作狀態(tài)，將檢測儀波長旋鈕旋到所需波長刻度上，把量程旋鈕撥到100%T檔（儀器預熱20分鐘，待基線平直后可加樣測試）。
⑶、接通記錄儀電源開關，使電源開關撥到“通”指示燈亮?？筛鶕?jù)記錄儀說明書調(diào)換不同的紙速度，用戶根據(jù)需要自行掌握，測量用10mV檔。此時記錄儀指針從零點開始向右移動某一刻度，調(diào)節(jié)檢測儀“光量”旋鈕使指針停留在記錄儀大約中間位置5mV左右數(shù)字顯示為50左右。。
⑷、把檢測儀進樣口聚乙烯塑料管接到恒流泵上，使凝膠層析柱中緩沖液流過檢測儀（恒流泵流量視凝膠層析柱大小選1-3ml/min）。用“調(diào)零”調(diào)整吸光度A值為0（量程開關撥到100%T調(diào)節(jié)光量旋鈕，使記錄儀指針在10mV數(shù)字顯示為100，即透光率為100%。把量程開關撥到“0.05A”檔，緩慢調(diào)節(jié)A調(diào)零旋鈕，使記錄儀指示在“O”位，檢測儀顯示為“O”）。
⑸、以上步驟結(jié)束，層析系統(tǒng)平衡后即可用洗脫液開始洗脫樣品，洗脫前再調(diào)一次吸光度0點。洗脫過程結(jié)束前不可再調(diào)節(jié)“調(diào)零”旋鈕。當洗脫液流過檢測儀時，吸光度顯示大于零的數(shù)值，吸光度數(shù)值大小隨樣品的濃度而變化。洗脫完畢后吸光度顯示為稍大于零的數(shù)值。
⑹、數(shù)字顯示吸光度和記錄儀自動繪制吸光度圖譜是兩個互相獨立的檢測系統(tǒng)，數(shù)字顯示吸光度與記錄儀所繪峰值大小沒有直接關系，不可互相換算。
⑺、測試完畢后，必須切斷電源，并用蒸餾水清洗樣品池和聚乙烯塑料管。