微生物研究技術(shù)——無菌操作技術(shù)
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活菌總數(shù);大腸菌群;大腸桿菌;腸道桿菌科;金黃色葡萄球菌;綠膿桿菌;沙門氏菌;李斯特菌;腸球菌;
亞硫酸鹽還原梭狀芽孢桿菌;產(chǎn)氣莢膜梭菌;霉菌(曲霉屬**、曲霉菌);酵母菌。
顯微鏡技術(shù)問世而使人類開始認(rèn)識(shí)了微生物,然而在對(duì)微生物的生命活動(dòng)和功能有所知曉之前,微生物學(xué)并沒有誕生。促使微生物學(xué)迅速誕生的,是無菌操作技術(shù)和純種培養(yǎng)技術(shù)。在1861年,偉大的微生物學(xué)家巴斯德做了一個(gè)有名的實(shí)驗(yàn)。對(duì)于微生物學(xué)發(fā)展具有決定性的作用。
巴斯德用一個(gè)有長(zhǎng)頸的圓底燒瓶裝上肉湯,如果就這么放著,幾天后肉湯便渾濁發(fā)臭了,用顯微鏡可以觀察到里面長(zhǎng)了許多細(xì)菌。如果把長(zhǎng)長(zhǎng)的瓶頸用火焰燒成彎曲狀,雖然瓶口還是和外界相通,氧氣可以自由出入,可是肉湯放置很長(zhǎng)時(shí)間也不會(huì)變渾濁。如果把里面的肉湯從彎曲處往瓶口傾折,讓液體接觸瓶口,再讓液體流回瓶中,幾天后,液體又變渾發(fā)臭了。巴斯德這個(gè)實(shí)驗(yàn)充分說明,肉湯之所以變渾發(fā)臭,是肉湯里面的細(xì)菌繁殖造成的,如果加熱殺死了肉湯里面的細(xì)菌,又不讓外面的細(xì)菌進(jìn)去,肉湯就不會(huì)有細(xì)菌生長(zhǎng)。液體和瓶口接觸后,因?yàn)榭諝庵械膲m埃和細(xì)菌沾在瓶口,通過肉湯進(jìn)入瓶?jī)?nèi),所以幾天后會(huì)變渾發(fā)臭。而且,燒瓶盡管有彎長(zhǎng)的頸,可是瓶口是和外界相通的,空氣可以自由進(jìn)入,所以可以保證里面有氧氣,所以不是沒有氧氣而使細(xì)菌不能生長(zhǎng)。
直到20世紀(jì)60年代,在倫敦的一個(gè)研究所中,還一直保存著19世紀(jì)后期為否定自然發(fā)生論所用的的一些陳年肉湯,它們?cè)?0年后依然清亮如故。巴斯德這個(gè)簡(jiǎn)單但是具有說服力的有名實(shí)驗(yàn),證實(shí)了微生物只能從微生物產(chǎn)生而不能自然地從沒有生命的物質(zhì)發(fā)生。從此,人們開始認(rèn)識(shí)到無菌操作的重要。滅過菌的物質(zhì)在適當(dāng)保護(hù)下將保持無菌狀態(tài),除非有人去感染它。巴斯德奠定了這個(gè)微生物學(xué)的基本原理。
-- 巴斯德否定自然發(fā)生論的實(shí)驗(yàn) --
**和**的方法:
我們知道了消除微生物對(duì)外科手術(shù)和食品保藏的重要性,也明白要研究某種微生物,實(shí)現(xiàn)必須保證沒有混雜由外界進(jìn)入的不相干的其他微生物,就必須把培養(yǎng)微生物的環(huán)境徹底**。這是無菌操作的前提。100多年來,科學(xué)家們發(fā)明了各種**和**的方法。
在講述這些方法之前,我們要弄清**和**兩個(gè)不同的概念。所謂**,是指消除附著在器具或食品中的有害的(或者引起**,或者使食品腐爛)微生物。但**不一定能消滅全部微生物。例如李斯特用石炭酸處理外科手術(shù)器械并不能殺死全部微生物。因?yàn)橛械奈⑸锉容^皮實(shí),采用過激的手段殺死它們的同時(shí)容易把器具或食品破壞掉。不過這些皮實(shí)的微生物一般不會(huì)致病,在其他條件不具備時(shí)也不易生長(zhǎng),保留他們影響不大。如果我們的目的是研究某一種微生物,則必須保證在我們的器具中和培養(yǎng)它們的基質(zhì)內(nèi)沒有任何其他微生物混雜,這時(shí)就必須在放進(jìn)要研究的某種特定微生物之前,把容器內(nèi)的全部微生物殺死他們,這種處理方法就是**。
其實(shí),在人類長(zhǎng)期生活實(shí)踐中已經(jīng)采用過**和**的方法,不過在微生物學(xué)誕生前,人們只是知其然,不知其所以然罷了。例如在沒有冰箱之前,我們知道在夏天把剩菜剩飯重新加熱后**天就不會(huì)餿,再如把得重病死亡者的用具全部付之一炬。這就是**和**。