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技術(shù)文章

沙門氏菌鑒定檢驗原始記錄
                                    
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  *****預(yù)防控制中心      
沙門氏菌鑒定檢驗原始記錄
記錄編號：WJ-027                                         第 1 頁 共 1 頁
受理編號
 
受檢單位
 
樣品名稱
 
檢驗依據(jù)
GB4789.4-2010《食品國家**標(biāo)準(zhǔn)食品中衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗沙門氏菌檢驗》
收樣日期
20 年   月   日
檢測儀器
HHB11-420型電熱恒溫培養(yǎng)箱(編號: 025)、3J0484型奧林巴斯顯微鏡(編號：032)、TN-100B型托盤式扭力天平(編號：001)
檢驗日期
20 年   月   日
檢測項目
沙門氏菌
1.前增菌：（20   年   月   日）
 取檢樣        加入含BPW225mL的均質(zhì)杯中，以      r/min均質(zhì)   min，轉(zhuǎn)入錐形瓶    ℃培養(yǎng)   ；h
2.增菌：（20   年   月   日）
輕輕搖動培養(yǎng)過的樣品混合物，移取 1 mL，轉(zhuǎn)種于 10 mL TTB 內(nèi)，于    ℃培養(yǎng)    h。同時，另取 1 mL，轉(zhuǎn)種于 10 mL SC 內(nèi)，于    ℃培養(yǎng)    h；
3.分離：（20   年   月   日）
 分別用接種環(huán)取增菌液 1 環(huán)，劃線接種于一個 BS 瓊脂平板和一個 XLD 瓊脂平板。于    ℃分別培養(yǎng)   h （XLD 瓊脂平板）   h（BS瓊脂平板），觀察各個平板上生長的菌落,
BS上可疑菌落形態(tài)：※菌落顏色：□黑色有金屬光澤□棕褐色□灰色□灰綠色
※周圍培養(yǎng)基：□呈黑色或棕色□不變□
※□其它：
XLD上可疑菌落形態(tài)：□粉紅色□黃色□黑色中心□全部黑色的菌落□其它：  
4.生化試驗：（20   年   月   日）
  自選擇性瓊脂平板上分別挑取    個典型或可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂，先在斜面劃線，再于底層穿刺；接種針不要**,直接接種賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基、蛋白胨水（供做靛基質(zhì)試驗）、尿素瓊脂 （pH7.2）、***（KCN）培養(yǎng)基和營養(yǎng)瓊脂平板，于   ℃培養(yǎng)    ，將已挑菌落的平板儲存于室溫保留24 h，以備必要時復(fù)查。反應(yīng)結(jié)果見表1、表2，表3為補(bǔ)做試驗。h 
表1在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基內(nèi)的反應(yīng)結(jié)果
三糖鐵瓊脂
賴氨酸脫羧酶試驗
培養(yǎng)基
初步判斷
斜面
底層
產(chǎn)氣
硫化氫
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
注：K：產(chǎn)堿，A：產(chǎn)酸；＋：陽性，－：陰性；初步判斷：可疑沙門氏菌屬或非沙門氏菌。
表2生化反應(yīng)初步鑒別表
硫化氫（H2S）
靛基質(zhì)
pH7.2尿素
***（KCN）
賴氨酸脫羧酶
反應(yīng)序號（判斷）
 
 
 
 
 
 
注：＋陽性；－陰性；＋/－陽性或陰性；反應(yīng)序號（判斷）：A1、A2、A3或非沙門氏菌。
表3補(bǔ)做試驗（選做）
甘露醇
山梨醇
ONPG
結(jié)果判斷
 
 
 
 
注：＋：陽性，－：陰性；結(jié)果判斷：沙門氏菌或非沙門氏菌。
 
5.血清學(xué)鑒定：（20   年   月   日）
 玻片上劃出2個約1cm×2cm的區(qū)域，挑取1環(huán)待測菌，各放1/2環(huán)于玻片上的每一區(qū)域上部，在其中一個區(qū)域下部加1滴多價菌體（O）抗血清，在另一區(qū)域下部加入1滴生理鹽水，作為對照。再用無菌的接種環(huán)或針分別將兩個區(qū)域內(nèi)的菌落研成乳狀液。將玻片傾斜搖動混合1min，并對著黑暗背景進(jìn)行觀察。
    血清凝集結(jié)果：                  （+或-）
7.結(jié)果：（20   年   月   日）
              沙門氏菌。
檢驗者：                       復(fù)核者：                      檢畢日期：20   年   月   日